紫葉酢漿草的組織培養(yǎng).pdf

1、本文以紫葉酢漿草葉柄、葉片、鱗片為外植體，研究了愈傷組織誘導和器官發(fā)生的適宜條件，建立離體培養(yǎng)再生體系和細胞懸浮培養(yǎng)系；通過對懸浮培養(yǎng)體系的動力學研究，探討愈傷組織懸浮培養(yǎng)的最佳條件和懸浮培養(yǎng)過程中一些生長參數(shù)的動態(tài)變化，建立一個繁殖系數(shù)大、繁殖效率高的組培快繁體系，為進一步利用生物反應器進行體細胞胚的大規(guī)模培養(yǎng)打下基礎，為大規(guī)模工廠化生產提供理論依據(jù)；通過對紫葉酢漿草染色體核型分析，確定了其染色體數(shù)目及核型公式。結果表明：以葉片為外植

2、體，最佳誘導培養(yǎng)基為 MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖4％；以葉柄為外植體時，最佳誘導培養(yǎng)基為 MS + 6-BA 0.5mg/L+2,4-D 2.5mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖4％；以鱗片為外植體誘導愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為 MS+ 6-BA 0.5mg/L+2,4-D 2.5mg/L+ NAA 0.2mg/L+蔗糖4％；愈傷組織最佳的繼代培養(yǎng)基應為：MS+6-BA 0.

3、5mg/L+2,4-D 1.5mg/L+蔗糖4％；懸浮培養(yǎng)的最佳條件：愈傷組織接種量為1.5g/30ml 鮮重、搖床轉速為100rpm、繼代周期為5～6d；懸浮培養(yǎng)時所經歷的不同生理階段：0～3d 為遲滯期，4～8d為對數(shù)生長期，8d后細胞培養(yǎng)進入穩(wěn)定期和死亡期，細胞增殖率可達205％，其生長曲線為“S”型；懸浮培養(yǎng)過程中底物動力學變化是：懸浮細胞首先將蔗糖分解為葡萄糖和果糖，優(yōu)先利用葡萄糖，對果糖的利用相對滯后，總糖在生長過程中呈緩慢