循環(huán)microRNA在ACS血瘀證輕重及預(yù)后評(píng)估中的意義.pdf

1、自陳可冀院士首先倡導(dǎo)活血化瘀治療冠心病以來(lái)，活血化瘀療法顯著提高了傳統(tǒng)中醫(yī)治療心血管疾病的療效。目前常用活血化瘀藥物分為和血藥、活血藥、破血藥三類(lèi)。血瘀輕者，用破血逐瘀之品，有傷血?jiǎng)友?血瘀重者，單用和血、活血之品，藥力不足，瘀血除之不盡。故臨床用藥時(shí)當(dāng)先辨別血瘀輕重。但傳統(tǒng)辨證根據(jù)理論知識(shí)及個(gè)人經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行血瘀診斷及輕重鑒別，具有一定的主觀(guān)性和不可重復(fù)性，一定程度上影響了臨床療效。急性冠脈綜合征(ACS)是冠心病的一種嚴(yán)重類(lèi)型，既往研

2、究提示血瘀程度越重，再發(fā)心血管事件的可能性越大。microRNA作為系統(tǒng)生物學(xué)中功能基因組學(xué)一部分，具有時(shí)效性、整體性等特點(diǎn)，這與中醫(yī)學(xué)的整體觀(guān)念、恒動(dòng)觀(guān)不謀而合。課題組前期研究顯示冠心病血瘀證與非血瘀證存在microRNA的差異性表達(dá)，本研究進(jìn)一步探索循環(huán)microRNA在ACS血瘀證量化診斷及預(yù)后評(píng)估中的作用，對(duì)發(fā)現(xiàn)血瘀證新的診斷標(biāo)識(shí)和預(yù)后評(píng)估指標(biāo)，具有重要臨床意義。
　　目的:
　　1.尋找能夠判別急性冠脈綜合征血瘀輕

3、證和重證的客觀(guān)指標(biāo)，為血瘀證的量化診斷提供客觀(guān)依據(jù);2.研究循環(huán)microRNA在ACS血瘀輕重判別、預(yù)后評(píng)估中的作用，評(píng)價(jià)其作為ACS血瘀證診斷標(biāo)識(shí)、預(yù)后評(píng)估的意義。
　　方法:
　　1.以急性冠脈綜合征血瘀輕證和重證患者為研究對(duì)象，以健康志愿者為對(duì)照，比較其在血常規(guī)(WBC、PLT)、血脂(TC、TG、HDL-C、LDL-C)、凝血功能(FBG、D-Di、FDP)、炎癥因子(hsCRP、HCY)、TnI、BNP、血小板抑

4、制率、血小板最大聚集率、冠脈病變情況等方面有無(wú)差異，為輕重判別提供客觀(guān)依據(jù);
　　2.采用熒光定量qRT-PCR技術(shù)，以血瘀輕證和重證為研究對(duì)象，以健康志愿者為對(duì)照，比較各組間4種循環(huán)microRNA(miR-208a-3p、 miR-222-3p、miR-16、miR-198)表達(dá)有無(wú)差異，并對(duì)血瘀證計(jì)分與4種循環(huán)microRNA的相對(duì)表達(dá)量進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　3.比較兩組患者GRACE預(yù)測(cè)積分、危險(xiǎn)分層、主要不良心臟事

5、件(MACE)的發(fā)生有無(wú)差異，并對(duì)血瘀證計(jì)分與GRACE預(yù)測(cè)積分進(jìn)行相關(guān)性分析，探究血瘀輕重與預(yù)后關(guān)系。
　　4.將GRACE預(yù)測(cè)積分與4種循環(huán)microRNA的相對(duì)表達(dá)量進(jìn)行相關(guān)性分析，尋找能夠指導(dǎo)預(yù)后的microRNA。
　　結(jié)果:
　　1.臨床理化指標(biāo)中，ACS血瘀輕證和重證患者血小板計(jì)數(shù)均較健康志愿者降低(p＜0.05)，輕重證患者的比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＞0.05);血瘀重證TC、HDL-C較健康志愿者降低(p

6、＜0.05)，而血瘀輕證較健康志愿者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05))，血瘀輕重證患者比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＞0.05);兩組患者TG均較健康志愿者升高，LDL-C均較健康志愿者降低(p＜0.05)，血瘀輕證和重證患者TG、LDL-C無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＞0.05)。
　　2.血瘀輕證較健康志愿者miR-222-3p相對(duì)表達(dá)量出現(xiàn)下調(diào)，血瘀重證miR-222-3p相對(duì)表達(dá)量與健康志愿者比較無(wú)明顯差異。血瘀輕證較健康志愿者miR-198出

7、現(xiàn)表達(dá)水平上調(diào)，血瘀重證與健康志愿者無(wú)明顯差異，血瘀重證較血瘀輕證患者出現(xiàn)表達(dá)下降。與健康志愿者比較，miR-208a-3p在血瘀輕證組和重證組均明顯升高，但輕證和重證組之間無(wú)明顯差異。4種microRNA的相對(duì)表達(dá)量與血瘀證計(jì)分無(wú)明顯相關(guān)性。
　　3.兩組患者在GRACE預(yù)測(cè)積分、MACE事件的發(fā)生方面無(wú)明顯差異。但兩組患者在6個(gè)月全因死亡GRACE危險(xiǎn)分層方面有差異，血瘀輕證組低危所占比例最高，為80.65％;血瘀重證組低危和

8、中危所占比例分別為51.72％和44.83％。血瘀證計(jì)分與患者在院全因死亡、6個(gè)月全因死亡GRACE預(yù)測(cè)積分具有相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別為0.31、0.33、0.24(p＜0.05)。
　　4.4種microRNA的相對(duì)表達(dá)量與上述GRACE預(yù)測(cè)積分無(wú)明顯相關(guān)性。
　　結(jié)論:
　　1.以健康志愿者為對(duì)照，高密度脂蛋白可作為協(xié)助判別血瘀輕重證的客觀(guān)指標(biāo)。血瘀重證患者較健康志愿者高密度脂蛋白下降。
　　2.以健康志愿者為

9、對(duì)照，miR-222-3p、miR-198能夠協(xié)助判別血瘀輕證和重證。血瘀輕證患者較健康志愿者miR-222-3p相對(duì)表達(dá)量下降。血瘀輕證患者較血瘀重證、健康志愿者出現(xiàn)miR-198相對(duì)表達(dá)量的上調(diào)。miR-208a-3p可作為血瘀證與健康志愿者的判別，但不能用于判別血瘀輕重，血瘀證患者中miR-208a-3p表達(dá)上調(diào)。4種microRNA的相對(duì)表達(dá)量與血瘀證計(jì)分無(wú)明顯相關(guān)性。
　　3.ACS血瘀輕證患者6個(gè)月全因死亡GRACE危