基于胃腸動(dòng)力探討健脾方劑對FD脾虛證病證結(jié)合大鼠模型的作用研究.pdf

1、研究背景:
　　功能性消化不良(functional dyspepsia，F(xiàn)D)系一類臨床上常見和多發(fā)的胃腸功能紊亂性疾病，主要表現(xiàn)為餐后飽脹不適、早飽、上腹痛和上腹燒灼感等，根據(jù)羅馬Ⅳ將其分為餐后不適綜合征(Postprandial Distress syndrome，PDS)和上腹痛綜合征(Epigastric Pain Syndrome，EPS)，其中餐后不適綜合征主要表現(xiàn)為早飽及餐后飽脹感，上腹痛綜合征主要為位于上腹部的疼

2、痛或燒灼感。其在全球發(fā)病率可達(dá)11.5％～29.2％[1]，影響了全球1/4以上的人口。
　　其病理生理機(jī)制并不十分明確，目前西醫(yī)專家多認(rèn)為與胃腸動(dòng)力異常、內(nèi)臟敏感性增高、胃酸分泌過多、幽門螺桿菌感染、腦-腸軸、自主神經(jīng)系統(tǒng)和胃腸激素、社會(huì)心理學(xué)因素等相關(guān)，主要通過促進(jìn)胃腸動(dòng)力、降低內(nèi)臟高敏感、治療HP感染、抑制胃酸分泌、保護(hù)胃黏膜及精神心理治療等，多采用單靶點(diǎn)對癥治療。中醫(yī)認(rèn)為功能性消化不良上腹燒灼感主要與“嘈雜”相對應(yīng)，“上腹

3、痛”與“胃痛”、“胃脘痛”對應(yīng)，而餐后不適與早飽主要與“痞滿”相應(yīng)，基本病機(jī)為脾胃升降失司，功能失調(diào)，胃氣壅滯，以脾虛氣滯為主，治療以健脾理氣為主，中醫(yī)藥在FD的治療方面有其獨(dú)特的優(yōu)勢，本研究通過采用健脾方劑通過在體及離體方式干預(yù)FD脾虛證病證結(jié)合大鼠模型，研究其作用機(jī)制。
　　研究目的:
　　1.通過對脾虛Ⅰ號方及香砂六君子湯進(jìn)行在體藥效及藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)，觀察健脾方劑對FD脾虛證病證結(jié)合模型大鼠胃腸動(dòng)力的作用，探討其治療FD的

4、可能作用機(jī)制;
　　2.通過離體狀態(tài)下給予FD脾虛證病證結(jié)合模型大鼠不同劑量健脾方劑進(jìn)行干預(yù)，探討健脾方劑對大鼠不同部位胃組織胃動(dòng)力的直接影響;
　　3.觀察離體狀態(tài)下不同健脾組合物對不同部位胃組織胃動(dòng)力的直接影響。
　　研究內(nèi)容:
　　實(shí)驗(yàn)一、FD脾虛證病證結(jié)合大鼠模型的建立與評價(jià)
　　目的:建立與評價(jià)FD脾虛證病證結(jié)合大鼠模型
　　材料和方法:將30只雄性SD大鼠（乳鼠）隨機(jī)分為正常組、單純碘乙酰

5、胺灌胃組（疾病組）、碘乙酰胺灌胃疊加小平臺站立組（病證結(jié)合組），出生7日購進(jìn)，3天適應(yīng)性飼養(yǎng)。出生10日SD雄性乳鼠，正常組每日以2％蔗糖溶液灌胃;模型組每日以0.1％碘乙酰胺溶液灌胃，每只0.2ml，連續(xù)灌胃6天;大鼠3周齡時(shí)，剔除母鼠，分籠，至大鼠6周齡后，繼續(xù)給予正常鼠飼料喂養(yǎng);碘乙酰胺疊加小平臺站立組每日18:00-8:00進(jìn)行小平臺站立，連續(xù)14天。造模結(jié)束后分別觀察一般情況、體重、進(jìn)食量、飲水量、抓力、糖水偏好情況、血清乳酸

6、、D-木糖、淀粉酶含量等。
　　結(jié)果:
　　(1)一般情況:病證結(jié)合模型組大鼠體重、進(jìn)食量、飲水量與正常組及疾病模型組相比，明顯偏低(P＜0.05)。
　　(2)抓力測定:病證結(jié)合模型組大鼠抓力與正常組和疾病模型組相比顯著降低（P＜0.05）。
　　(3)糖水偏好情況:病證結(jié)合模型組大鼠在糖水消耗量方面有所降低，但與正常組及疾病模型組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(4)血清學(xué)指標(biāo):與正常組及

7、疾病模型組比較，病證結(jié)合模型組血清D-木糖、淀粉酶含量顯著降低（P＜0.05），血清乳酸含量顯著增加(P＜0.01)。
　　實(shí)驗(yàn)二、健脾方劑對FD脾虛證病證結(jié)合大鼠模型在體胃腸動(dòng)力作用機(jī)制的研究
　　目的:觀察脾虛Ⅰ號方及香砂六君子湯對FD脾虛證模型大鼠胃腸動(dòng)力的作用，從胃排空、小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)及血清胃腸激素水平探討其治療FD的可能作用機(jī)制。
　　材料與方法:采取碘乙酰胺疊加小平臺站立法建立FD脾虛證病證結(jié)合大鼠模型，實(shí)驗(yàn)

8、動(dòng)物隨機(jī)分為正常組、模型組、西藥組（多潘立酮組）、脾虛Ⅰ號方高劑量組、中劑量組、低劑量組、香砂六君子高劑量組、中劑量組、低劑量組。造模結(jié)束后，按每10ml·kg-1體重大鼠給藥1ml以脾虛Ⅰ號方或香砂六君子或多潘立酮或蒸餾水灌胃14d。在此過程中，定時(shí)觀察并記錄大鼠體重、進(jìn)食量、飲水量、抓力、毛色、活動(dòng)等一般情況。治療完成后，給予大鼠灌胃營養(yǎng)性半固體糊，計(jì)算各組大鼠胃內(nèi)殘留率及小腸推進(jìn)比。麻醉狀態(tài)下腹主動(dòng)脈取血，用ELISA或比色法檢測

9、血清中淀粉酶、D-木糖、乳酸、胃動(dòng)素(MTL)、胃泌素(GAS)、促胃生長素(Ghrelin)、膽囊收縮素(CCK)、生長抑素(SS)、血管活性腸肽(VIP)含量。
　　結(jié)果:
　　1.一般情況
　　治療前，與正常組比較，模型組及其余各組大鼠體重、進(jìn)食量、飲水量、抓力均顯著降低（P＜0.05）。與模型組比較，除正常組外，其余各組間大鼠體重、進(jìn)食量、飲水量、抓力均無明顯差異（P＞0.05）。
　　治療后，與模型組比

10、較，西藥組，香砂低、中、高劑量組，脾虛中、高劑量組大鼠體重顯著升高(P＜0.05)。香砂高劑量組，脾虛高劑量組大鼠飲水量顯著升高(P＜0.05)。香砂高、中、低劑量組，脾虛高、中、低劑量組大鼠進(jìn)食量顯著升高(P＜0.05)。西藥組，香砂高、中劑量組，脾虛高、低劑量組大鼠抓力顯著升高（P＜0.05）。
　　與西藥組比較，香砂高劑量組，脾虛高劑量組大鼠飲水量顯著升高（P＜0.05）。脾虛高、中劑量組大鼠進(jìn)食量顯著升高(P＜0.05)。

11、各組大鼠體重、抓力與西藥組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.胃內(nèi)殘留率和小腸推進(jìn)比
　　(1)與正常組比較，模型組大鼠胃內(nèi)殘留率顯著高于正常組(P＜0.01);與模型組比較，西藥組、脾虛低劑量、香砂高劑量組大鼠胃內(nèi)殘留率顯著降低（P＜0.05）;與西藥組比較，脾虛中、高劑量組，香砂低、中劑量組大鼠胃內(nèi)殘留率顯著高于西藥組(P＜0.05)。
　　(2)與正常組比較，模型組大鼠小腸推進(jìn)比顯著低于正常組（P＜

12、0.05）;與模型組比較，西藥組、脾虛低、中、高劑量組、香砂高劑量組小腸推進(jìn)比顯著劑量增加(P＜0.05);與西藥組比較，脾虛高劑量組小腸推進(jìn)比顯著高于西藥組（P＜0.01），香砂低劑量小腸推進(jìn)比顯著低于西藥組(P＜0.05)。
　　3.血清學(xué)指標(biāo)
　　(1)與正常組比較，模型組血清D-木糖含量顯著低于正常組（P＜0.05）;與模型組比較，西藥組、脾虛低劑量組血清D木糖含量均顯著高于模型組(P＜0.01);與西藥組比較，各中

13、藥組血清D-木糖含量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(2)與正常組比較，模型組血清淀粉酶含量顯著降低于(P＜0.05);與模型組比較，西藥組、脾虛中、高劑量組，香砂低、高劑量組血清淀粉酶含量均顯著高于模型組（P＜0.05）;與西藥組比較，各中藥組血清淀粉酶含量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(3)與正常組比較，模型組血清乳酸含量模型組顯著升高(P＜0.05);與模型組比較，給藥后西藥組、脾虛中、高劑量，香

14、砂低、中劑量血清乳酸含量均顯著低于模型組（P＜0.05）;與西藥組比較，各中藥組血清乳酸含量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　(4)與正常組比較，模型組血清胃動(dòng)素含量顯著低于正常組(P＜0.01);與模型組比較，西藥組、脾虛低、中、高劑量組，香砂低、中、高劑量組血清胃動(dòng)素含量均高于模型組（P＜0.01）;與西藥組比較，脾虛中、高劑量組，香砂低、中劑量組血清胃動(dòng)素含量均高于西藥組(P＜0.05)。
　　(5)與正常組比

15、較，模型組血清胃泌素含量顯著低于正常組(P＜0.01);與模型組比較，西藥組、脾虛低、中、高劑量組，香砂低、中、高劑量組血清胃泌素含量均高于模型組(P＜0.01);與西藥組比較，脾虛高劑量組血清胃泌素含量顯著高于西藥組(P＜0.05)。
　　(6)與正常組比較，模型組血清促胃生長素含量顯著低于正常組（P＜0.05）;與模型組比較，西藥組、脾虛中、高劑量組，香砂高劑量組血清促胃生長素含量顯著高于模型組（P＜0.05）;與西藥組比較，

16、香砂高劑量組、脾虛高劑量組血清促胃生長素含量顯著高于西藥組(P＜0.05)。
　　(7)與正常組比較，模型組血清膽囊收縮素含量高于正常組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;與模型組比較，香砂低劑量組血清膽囊收縮素含量顯著低于模型組(P＜0.05);與西藥組比較，香砂高劑量組血清膽囊收縮素含量顯著高于西藥組（P＜0.05）
　　(8)與正常組比較，模型組血清血管活性腸肽含量顯著高于正常組(P＜0.05);與模型組比較，香砂高

17、劑量組顯著高于模型組(P＜0.05);與西藥組比較，各中藥組血清血管活性腸肽含量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)
　　(9)與正常組比較，模型組血清生長抑素含量顯著高于正常組(P＜0.05);與模型組比較，香砂中劑量組血清生長抑素含量顯著降低(P＜0.05);與西藥組比較，各中藥組血清生長抑素含量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)
　　實(shí)驗(yàn)三、健脾方劑對FD脾虛證模型大鼠離體組織胃動(dòng)力的作用研究
　　目的:通過觀察脾

18、虛Ⅰ號方及香砂六君子湯干預(yù)功能性消化不良脾虛證模型大鼠離體胃組織，從胃體、胃竇收縮幅度和頻率及胃底張力角度，試圖明確脾虛Ⅰ號方及香砂六君子湯離體調(diào)節(jié)胃動(dòng)力的作用機(jī)制。
　　材料與方法:采取碘乙酰胺疊加小平臺法建立功能性消化不良脾虛證大鼠模型，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為正常組、模型組，造模后取正常組與模型組大鼠胃體、胃底、胃竇不同組織，比較模型組與正常組各部位收縮的差異，離體給予不同濃度的脾虛Ⅰ號方及香砂六君子湯，觀察藥物對模型胃體、胃竇收縮幅度

19、和頻率及胃底張力的影響。
　　結(jié)果:
　　(1)在離體狀態(tài)下，模型大鼠的胃底張力顯著高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），模型大鼠的胃竇、胃體收縮幅度和頻率均顯著低于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　(2)給予不同濃度的脾虛Ⅰ號方后可見FD模型大鼠胃底張力隨濃度增加而增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而香砂六君子的胃底張力隨給藥濃度而降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　(3)

20、給脾虛Ⅰ號方后胃竇收縮幅度隨給藥濃度而明顯增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其收縮頻率無明顯變化(P＞0.05)，給予香砂六君子低濃度時(shí)可顯著提高胃竇收縮幅度及頻率(P＜0.05)，當(dāng)濃度達(dá)到一定劑量時(shí)則抑制胃竇收縮頻率和幅度(P＞0.05)。
　　(4)給脾虛Ⅰ號方后胃體收縮幅度隨給藥濃度而減小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其收縮頻率則明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），給予香砂六君子不同濃度時(shí)胃體收縮幅度及

21、頻率均明顯減小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，當(dāng)濃度達(dá)到一定劑量時(shí)則抑制胃竇收縮頻率和幅度(P＜0.05)。
　　實(shí)驗(yàn)四、不同健脾藥物組合對正常大鼠離體胃動(dòng)力的作用研究
　　目的:通過觀察不同健脾藥對對離體大鼠胃竇收縮幅度及胃底張力的作用，探討離體狀態(tài)下不同健脾藥對對胃動(dòng)力的調(diào)節(jié)作用。
　　材料與方法:將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四組，取大鼠胃竇、胃底不同組織，離體給予不同濃度的健脾藥、健脾理氣藥、健脾化濕藥、健脾溫中藥的藥物組

22、合，觀察藥物對胃竇收縮幅度及胃底張力的作用差異。
　　結(jié)果:
　　(1)中藥健脾組、健脾化濕組、健脾溫中組可顯著提高胃底張力，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，健脾理氣組可顯著降低胃底張力，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　(2)中藥健脾組，健脾化濕組可增加胃竇收縮幅度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，健脾理氣組可顯著減小胃竇收縮幅度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，健脾溫中組對胃竇作用效果無差異（P＞0.0

23、5）。
　　研究結(jié)論:
　　1.碘乙酰胺灌胃疊加改良小平臺法站立制作出的功能性消化不良動(dòng)物模型符合脾虛證特征，具有胃動(dòng)力障礙表現(xiàn)。
　　2.健脾方劑可以改善FD大鼠胃腸道吸收功能及乳酸堆積造成的肢倦乏力狀態(tài)。
　　3.健脾方劑方可直接促進(jìn)模型大鼠胃排空及小腸推進(jìn)或通過改善胃腸激素，調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)，其中脾虛Ⅰ號方的小腸推進(jìn)作用優(yōu)于香砂六君子。
　　4.在離體狀態(tài)下，健脾方劑可直接作用于胃組織而改善胃動(dòng)力，健脾方