交聯(lián)殼聚糖-賴氨酸樹脂固定化GOD制備、表征及應(yīng)用.pdf

1、以戊二醛為交聯(lián)劑、碳酸鈣為致孔劑，反相懸浮交聯(lián)制備交聯(lián)殼聚糖；以二環(huán)己基碳二亞胺縮合，制備出交聯(lián)殼聚糖-賴氨酸樹脂；交聯(lián)及縮合反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率分別為90.28％和36.72%。FTIR和13C NMR分析均證實，樹脂分子結(jié)構(gòu)中分別出現(xiàn)西佛堿（N=C）和酰胺鍵（–CONH–），X-ray衍射證實其結(jié)晶度降低。交聯(lián)殼聚糖及交聯(lián)殼聚糖-賴氨酸樹脂呈黃褐色球狀、平均直徑800~1000μm、平均孔徑50~100μm，比面積分別達769.08/m2·

2、g-1和403.14/m2·g-1，后者在0.1mol/LHCl和0.1mol/LNaOH中的溶失率分別為0.0236%和0.0105%，在0.1mol/L醋酸、0.1mol/L HCl、去離子水、0.1mol/L NaOH中的溶脹度分別為325.15%、275.42%、24.86%、100.14%；對醋酸、丙氨酸、牛血清蛋白和Zn2+的交換容量分別為409.24、253.28、59.52、204.12mg/g干樹脂。
　　以交聯(lián)

3、殼聚糖-賴氨酸樹脂為載體，吸附-交聯(lián)制備固定化葡萄糖氧化酶（IGOD）的優(yōu)化條件為：酶﹕戊二醛﹕載體氨基的摩爾比為1.355×10-4﹕0.5290﹕1，在 pH4.0、常溫下交聯(lián)3h。固定化酶的偶聯(lián)率為50%，IGOD的活力為7.68U/mg、活力回收為82.50%；IGOD的主要酶學(xué)性質(zhì)是：最適pH5.0~6.0，最適溫度30~40℃，Km和Vmax分別為31.78 mmol/L和17.60U/mg，60℃半衰期為10h，室溫（25