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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:妊娠期高血壓疾病(hypertensive disorders complicatingpregnancy,HDP)是妊娠期間伴隨血壓升高的一組疾病,包括妊娠期高血壓、子癇前期、子癇以及慢性高血壓并發(fā)子癇前期和慢性高血壓合并妊娠。其發(fā)病機(jī)制到目前為止還不確定,普遍認(rèn)為是由于多種因素和多種途徑共同導(dǎo)致妊娠期高血壓疾病的發(fā)生,而母體機(jī)體彌漫性血管內(nèi)皮細(xì)胞的激活和(或)損傷是其發(fā)病的重要原因,但目前對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞激活和損傷的機(jī)制尚不清楚,如
2、果能通過(guò)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷情況,來(lái)判斷妊娠期高血壓疾病發(fā)生和發(fā)展的程度,對(duì)臨床上防治妊娠期高血壓疾病是十分關(guān)鍵的。
中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(neutrophilgelatinase-associated lipoealin,NGAL)屬于脂蛋白(lipoealin)家族的成員之一,它對(duì)多種細(xì)胞的增殖、生長(zhǎng)和分化具有促進(jìn)作用,可以降解組織中的膠原和蛋白成分,當(dāng)機(jī)體的局部組織出現(xiàn)炎癥或腫瘤時(shí),NGAL的含量會(huì)明顯增加,有
3、研究表明NGAL是評(píng)價(jià)因炎癥或腫瘤形成而導(dǎo)致內(nèi)皮損傷嚴(yán)重程度的重要標(biāo)志物。許多研究也顯示NGAL是早期檢測(cè)腎功能衰竭和急性炎癥的重要指標(biāo),具有高度的敏感性和特異度;此外研究表明NGAL在高血壓患者體內(nèi)的含量比正常人體內(nèi)的含量明顯升高。但對(duì)于妊娠期高血壓早發(fā)型和晚發(fā)型子癇前期患者的血液、尿液以及胎盤中NGAL蛋白量的表達(dá)情況如何,目前尚無(wú)研究。
本研究通過(guò)檢測(cè)妊娠期高血壓早發(fā)型和晚發(fā)型子癇前期患者的血液和尿液中NGAL的含量,以
4、及胎盤組織中NGAL的表達(dá)水平,并與同期正常對(duì)照組患者的血液、尿液以及胎盤組織中NGAL的表達(dá)水平相比較,探求NGAL在子癇前期的發(fā)生和發(fā)展中的作用,為進(jìn)一步研究子癇前期發(fā)病機(jī)制提供基礎(chǔ)的理論基礎(chǔ)。
方法:
1標(biāo)本的收集
選取2013年12月-2014年11月在邯鄲市第二醫(yī)院產(chǎn)科檢查并住院分娩的早發(fā)型子癇前期患者、晚發(fā)型子癇前期患者以及同期我院孕檢的正常孕婦各20例。孕婦均為單胎妊娠,無(wú)不良孕產(chǎn)史,沒有經(jīng)過(guò)
5、輔助生殖技術(shù)治療,除外妊娠期糖尿病、妊娠合并其它合并癥如糖尿病、高血壓疾病、心臟病等。
2 ELISA法檢測(cè)孕產(chǎn)婦血液和尿液中NGAL的含量
實(shí)驗(yàn)分六組:A組:早發(fā)型子癇前期組:年齡20-35歲,孕周20-34周(包括20周,不包括34周)。B組:晚發(fā)型子癇前期組:年齡20-35歲,孕周34-37周(包括34周,不包括37周)。C組:晚發(fā)型子癇前期組:年齡20-35歲,孕周37周以后(包括37周)。D組:<34周正常
6、孕婦組:年齡為20-29歲,孕周20-34周(包括20周,不包括34周)。E組:34-37周正常孕婦組:年齡21-30歲,孕周34-37周(包括34周,不包括37周)。F組:>37周正常孕婦組:年齡20-36歲,孕周37-42周(包括37周,包括42周)。
六組孕產(chǎn)婦均于入院后24小時(shí)內(nèi)抽空腹肘靜脈血3ml,晨尿液3ml,采用ELISA法檢測(cè)孕產(chǎn)婦血液和尿液中NGAL的含量。
3免疫組織化學(xué)法檢測(cè)胎盤組織中NGAL的
7、表達(dá)
實(shí)驗(yàn)分三組:早發(fā)型子癇前期組:年齡20-35歲,孕周20-34周(包括20周,不包括34周)。晚發(fā)型子癇前期組:年齡20-35歲,孕周34周以后(包括34周)。正常孕婦組:年齡20-36歲,孕周37-42周(包括37周,包括42周)。
三組孕產(chǎn)婦均于分娩后2分鐘內(nèi)取胎盤母面臍根部胎盤組織,大小為2.0cm×1.0cm×1.0cm。用生理鹽水反復(fù)清洗3遍后,放入含有固定液的病理袋做好標(biāo)記備用。以上均在無(wú)菌條件下操
8、作。
4應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。組間比較采用x2檢驗(yàn),P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
結(jié)果:
1早發(fā)型子癇前期組、晚發(fā)型子癇前期組與同期正常對(duì)照組血液中NGAL蛋白量的檢測(cè)
A組血液中NGAL蛋白量為1.635±0.1004g/L,C組血液中NGAL蛋白量為0.723±0.1124g/L;兩組血液中NGAL蛋白量比較有顯著性差異(P<0.01),B組血液中NGAL蛋白量為1.290±0
9、.0845g/L,E組血液中NGAL蛋白量為0.725±0.0539g/L;兩組血液中NGAL蛋白量比較有顯著性差異(P<0.01);C組血液中NGAL蛋白量為1.269±0.1173g/L,F(xiàn)組血液中NGAL蛋白量為:0.705±0.1094g/L;兩組血液中NGAL蛋白量比較有顯著性差異(P<0.01);A組血液中NGAL蛋白量與B組、C組血液中NGAL蛋白量相比均有顯著性差異(P<0.05);但是B組、C組血液中NGAL蛋白量相比
10、無(wú)明顯差異(P>0.05)。
2早發(fā)型子癇前期組、晚發(fā)型子癇前期組與同期正常對(duì)照組尿液中NGAL蛋白量的檢測(cè)
A組尿液中NGAL蛋白量為0.470±0.069g/L,D組尿液中NGAL蛋白量為:0.141±0.024g/L;兩組尿液中NGAL蛋白量比較有顯著性差異(P<0.01),B組尿液中NGAL蛋白量為0.258±0.042g/L,E組尿液中NGAL蛋白量為0.102±0.006g/L;兩組尿液中NGAL蛋白量比
11、較有顯著性差異(P<0.01);C組尿液中NGAL蛋白量為0.249±0.041 g/L,F(xiàn)組尿液中NGAL蛋白量為0.116±0.020g/L;兩組尿液中NGAL蛋白量比較有顯著性差異(P<0.01);A組尿液中NGAL蛋白量與B組、C組尿液中NGAL蛋白量相比均有顯著性差異(P<0.05);但是B組、C組尿液中NGAL蛋白量相比無(wú)明顯差異(P>0.05)。
3早發(fā)型子癇前期組、晚發(fā)型子癇前期組與正常對(duì)照組胎盤組織中NGAL
12、蛋白表達(dá)水平的檢測(cè)。
在胎盤組織的絨毛合體滋養(yǎng)細(xì)胞的胞質(zhì)中可見NGAL蛋白的陽(yáng)性表達(dá),顏色為棕黃色。正常對(duì)照組、早發(fā)型子癇前期組和晚發(fā)型子癇前期組的胎盤組織中NGAL蛋白表達(dá)光密度值分別為:10.15±0.86g/L,50.90±7.60g/L和30.51±4.16g/L,早發(fā)型和晚發(fā)型子癇前期組胎盤組織中NGAL蛋白表達(dá)光密度值均比正常對(duì)照組胎盤組織中NGAL蛋白表達(dá)光密度值增高,其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。早發(fā)型
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