單味中藥對(duì)無(wú)乳鏈球菌生物膜體外抑制作用的研究.pdf

1、無(wú)乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae），即B群鏈球菌（Group B Streptococcus, GBS），作為一種正常菌群常定植于健康人的鼻咽部、胃腸道及生殖道，但細(xì)菌可以通過(guò)產(chǎn)道引起新生兒如腦膜炎、敗血癥、肺炎等嚴(yán)重感染性疾病，此外還可引起孕產(chǎn)婦及非孕成人，尤其是中老年人和免疫低下的病人如糖尿病病人等多種嚴(yán)重感染。另外，無(wú)乳鏈球菌還是引起牛羊等反芻類(lèi)動(dòng)物乳腺炎的主要細(xì)菌。近年來(lái)隨著抗生素的大量使用，無(wú)乳鏈球

2、菌對(duì)青霉素、氨芐青霉素等的耐藥呈上升趨勢(shì)，對(duì)克林霉素、紅霉素及左氧氟沙星的耐藥較為普遍，其耐藥性問(wèn)題日漸嚴(yán)峻。研究發(fā)現(xiàn)，有較大比例的無(wú)乳鏈球菌在體內(nèi)能形成生物膜，生物膜的形成勢(shì)必造成感染遷徙、反復(fù)，不僅危害人類(lèi)健康，更給家庭和社會(huì)造成沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此探索新型的抑制無(wú)乳鏈球菌生物膜形成的藥物非常重要。
　　目的：
　　1.篩選生物膜陽(yáng)性的無(wú)乳鏈球菌。
　　2.從15種中藥免煎顆粒中篩選出對(duì)無(wú)乳鏈球菌在體外有抑菌活性的

3、中藥。
　　3.觀(guān)察單味中藥對(duì)無(wú)乳鏈球菌成熟生物膜的影響。
　　方法：1.利用剛果紅試驗(yàn)和半定量粘附試驗(yàn)對(duì)臨床分離得到的17株無(wú)乳鏈球菌在體外形成生物膜能力進(jìn)行篩選，篩選出生物膜陽(yáng)性菌株；
　　2.用微量肉湯稀釋法測(cè)定15種中藥免煎顆粒對(duì)無(wú)乳鏈球菌的最小抑菌濃度（Minimum inhibitory concentration, MIC）和最小殺菌濃度（Minimum bactericidal concentratio

4、n, MBC）。
　　3.通過(guò)半定量粘附試驗(yàn)和剛果紅-阿利新藍(lán)聯(lián)合染色法觀(guān)察丁香對(duì)無(wú)乳鏈球菌成熟生物膜的干預(yù)情況。
　　結(jié)果：1.臨床分離的17株無(wú)乳鏈球菌9株可以形成生物膜，生物膜陽(yáng)性率為52.94％。
　　2.對(duì)丁香（Clove）、知母（Rhizoma Anemarrhenae）、厚樸（Magnolia）、蘆根（Reed rhizome)、淡竹葉（Lophatherum gracile)、大青葉(Foliumisa

5、tidis)、細(xì)辛（asarum）、蛇床子(Cnidium monnieri）、蒲公英(Taraxacum mongolicum）、防己(Stephania tetrandra）、土茯苓（Rhizoma Smilacis Glabrae）、黃芩(Scutellaria baicalensis Georgi）、重樓(Paris polyphylla）、訶子（Terminalia chebula）、高良姜（Alpinia officinar

6、um Hance）等15味中藥對(duì)無(wú)乳鏈球菌進(jìn)行體外抑菌活性研究，結(jié)果顯示丁香對(duì)無(wú)乳鏈球菌的抑菌作用最強(qiáng)，其MIC為1.95mg/ml，厚樸、防己、黃芩也有較好的抑菌活性， MIC為7.80～31.25mg/ml；重樓和蛇床子的抑菌活性尚可，其MIC為62.50mg/ml，蒲公英、大青葉、淡竹葉及蘆根抑菌活性較弱，其MIC范圍為125～500mg/ml；知母、細(xì)辛、訶子、高良姜和土茯苓無(wú)抑菌作用。
　　3.半定量粘附試驗(yàn)檢測(cè)出丁香對(duì)