藥物、染料及表面活性劑分子與蛋白質(zhì)的相互作用研究.pdf

1、蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)最重要的物質(zhì)之一，它在生命活動(dòng)中扮演著多種角色，能與許多其他物質(zhì)接觸并相互作用，行使著重要的生理機(jī)能。對蛋白質(zhì)的研究也一直都是科研工作者們專注的課題，許多小分子與蛋白都有著密切的聯(lián)系，例如新藥的研發(fā)，用于檢測蛋白的染料探針，與人們生活相關(guān)的日用品中的表面活性劑組分的改進(jìn)等，因此小分子與生物大分子相互作用的研究不僅對從分子水平上揭示生命的奧秘具有重要的意義，并有助于人們在開發(fā)新的產(chǎn)品時(shí)提供一定的基礎(chǔ)理論支持。
　　

2、 本論文采用熒光光譜法研究了藥物小分子與蛋白質(zhì)相互作用的作用機(jī)理；紫外-可見光譜法及光譜修正技術(shù)研究了染料分子在蛋白質(zhì)上的聚集結(jié)合反應(yīng)；熒光探針技術(shù)研究新型Gemini表面活性劑G12-3-12和G12-4-12與蛋白質(zhì)的相互作用以及體系微環(huán)境的變化等。本文的研究內(nèi)容主要包括以下三個(gè)部分：
　　 一、采用熒光光譜和紫外吸收光譜法研究了牛血清白蛋白(BSA)與加替沙星(GTF)的相互作用機(jī)制。由熒光光譜可知加入GTF溶液后，BSA

3、的熒光強(qiáng)度降低，猝滅類型屬于靜態(tài)猝滅；用Stern-Volmer方程求得不同溫度(17℃和25℃)下它們的結(jié)合常數(shù)Ka和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)n；用熱力學(xué)方程處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)得到了結(jié)合反應(yīng)的相關(guān)熱力學(xué)參數(shù)(△G、△H和△S），判斷二者之間主要作用為靜電作用；并用三維熒光光譜和同步熒光光譜探討了GTF對BSA構(gòu)象的影響。
　　 二、應(yīng)用微相吸附-光譜修正技術(shù)研究了曙紅Y(EY)與牛血清白蛋白(BSA)的相互作用，討論了離子強(qiáng)度和溫度的影響，以及金

4、屬離子干擾情況等。結(jié)果表明，EY與BSA之間的作用符合Langmuir單分子層吸附，結(jié)合產(chǎn)物最大結(jié)合數(shù)比為NEY:NBSA=5:1；計(jì)算了不同溫度下反應(yīng)的結(jié)合常數(shù)K，發(fā)現(xiàn)K隨溫度的升高而減小；并測定了蛋白質(zhì)的工作曲線，該方法的檢出限為20mg/L。
　　 三、應(yīng)用熒光光譜法研究了Gemini表面活性劑G12-3-12、G12-4-12與牛血清白蛋白(BSA)的相互作用及體系微環(huán)境的變化等。G12-3-12和G12-4-12均能顯

5、著猝滅BSA的內(nèi)源熒光；在不同溫度下通過Stern-Volmer方程和熱力學(xué)方程處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，求得了反應(yīng)的猝滅常數(shù)Ksv，以及相關(guān)熱力學(xué)參數(shù)，并初步判斷二者主要是通過疏水力相互作用的；同時(shí)采用同步熒光技術(shù)考察了G12-3-12和G12-4-12對BSA構(gòu)象的影響。以芘為熒光探針，二苯甲酮為猝滅劑，用穩(wěn)態(tài)熒光探針法，輔以電導(dǎo)率法測定了G12-3-12與G12-4-12的臨界膠束濃度cmc;觀察了G12-3-12及G12-4-12溶液中加入