替米沙坦對胰島素抵抗OLETF大鼠心房肌L型鈣通道α1C亞單位表達(dá)的影響.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)以高脂飼料飼養(yǎng)自發(fā)性高血糖大鼠（otsuka long-evans tokushima fatty， OLETF），胰島素抵抗（insulin resistance，IR）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型造模成功后，以替米沙坦進(jìn)行藥物干預(yù)，旨在：1、研究IR-OLETF大鼠心房肌L型鈣通道α1C亞單位（L-type calcium channelα1C subunit，Cav1.2）的表達(dá)水平；2、研究血管緊張素II受體1型拮抗劑（angiot

2、ensin II type1 receptor blocker，ARB）替米沙坦對IR-OLETF大鼠的心房肌Cav1.2蛋白表達(dá)的影響；3、探討替米沙坦對心房肌Cav1.2蛋白表達(dá)的影響及其改善IR的可能機(jī)制。
　　方法:LETO（long-evans tokushima fatty）大鼠（雄性，1月齡，無特定病原體級）共計(jì)16只，OLETF大鼠（雄性，1月齡，無特定病原體級）共計(jì)32只,，體質(zhì)量范圍在135至185g，所有實(shí)驗(yàn)

3、動(dòng)物在標(biāo)準(zhǔn)飼料及干凈整潔環(huán)境條件下適應(yīng)性飼養(yǎng)1月。在2月齡時(shí)，所有OLETF大鼠以高脂飼料進(jìn)行喂養(yǎng)，于7月齡時(shí)停止進(jìn)食12小時(shí)后于股靜脈處取血，測定所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血清胰島素（fasting insulin，F(xiàn)INS）、空腹血糖（fasting blood glucose， FBG）的數(shù)值，并通過相關(guān)公式分析得出胰島素抵抗指數(shù)（insulin resistance index，HOMS-IR），分析大鼠胰島素抵抗模型是否造模成功。

4、　　用隨機(jī)數(shù)字表法將32只造模成功的IR-OLETF大鼠分為2組，16只模型組（M）的大鼠繼續(xù)以高脂飼料飼養(yǎng)，16只替米沙坦（T）組大鼠以高脂飼料飼養(yǎng)并加用替米沙坦（5mg/kg﹒d）進(jìn)行干預(yù)，16只LETO大鼠作為正常對照（NC）組，始終以標(biāo)準(zhǔn)飼料進(jìn)行飼養(yǎng)。按上述方法飼養(yǎng)大鼠5月后，所用大鼠再次停止進(jìn)食12小時(shí)后于股靜脈處取血，通過放射免疫法檢測 FINS，以葡萄糖酶法檢測 FBG，使用全自動(dòng)生化分析儀檢測甘油三酯（triglycer

5、ide，TG）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、總膽固醇（total cholesterol， TC）及低密度脂蛋白（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）。然后使用脊椎脫臼法處死所用大鼠，迅速取出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物內(nèi)臟（心臟、肝臟、腎臟、眼球等）組織保存于凍存管中，置入-80℃冰箱中低溫密閉封存，使用為蛋白質(zhì)印跡法檢測所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

6、心房肌組織中Cav1.2蛋白的表達(dá)量。采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件將所得結(jié)果進(jìn)行計(jì)算分析。
　　結(jié)果:
　　1、三組間實(shí)驗(yàn)大鼠的FINS，F(xiàn)BG，HOMA-IR的比較：T組和M組比較， FINS，F(xiàn)BG，HOMA-IR的數(shù)值明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；和NC組相比較，M組的FINS，F(xiàn)BG，HOMA-IR的數(shù)值顯著增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　2、三組間實(shí)驗(yàn)大鼠血脂代謝水平的比較：T組和M組比較，L

7、DL-C，TG， TC的數(shù)值顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。但HDL-C的數(shù)值無明顯改變，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.384）；M組LDL-C，TG，TC的數(shù)值明顯高于NC組，HDL-C數(shù)值明顯低于NC組。
　　3、三組間實(shí)驗(yàn)大鼠心房肌組織Cav1.2蛋白表達(dá)含量的比較：T組與M組相比，心房肌組織中Cav1.2蛋白水平明顯升高，M組與NC組相比，心房肌組織中Cav1.2蛋白水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）

8、。
　　結(jié)論:
　　1、通過高脂飼養(yǎng)并成功建立胰島素抵抗模型的OLETF大鼠血清中FINS， FBG，HOMA-IR，TG、LDL-C和TC數(shù)值顯著升高，HDL-C數(shù)值顯著降低。
　　2、替米沙坦干預(yù)后，IR大鼠血清FBG，F(xiàn)INS，HOMA-IR，TC，TG和LDL-C水平明顯降低，表明替米沙坦可以通過改善IR大鼠的糖脂代謝，改善其胰島素抵抗。
　　3、OLETF大鼠心房肌組織中Cav1.2的表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，胰島