生長抑素在小鼠高脂血癥相關(guān)性急性胰腺炎時對PI3K-PKB細胞信號通路的影響.pdf

1、目的:1.了解PI3K/PKB信號轉(zhuǎn)導通路在高脂血癥相關(guān)性急性胰腺炎中的變化，進一步探討高脂血癥相關(guān)性急性胰腺炎的發(fā)病機制。2.研究生長抑素與PI3K/PKB信號轉(zhuǎn)導通路調(diào)節(jié)關(guān)系，了解生長抑素對PI3K/PKB細胞信號通路的影響，進一步闡明生長抑素治療高脂血癥相關(guān)性急性胰腺炎的機制。
　　方法:1.將健康清潔級雄性昆明小鼠30只，體重20-24g。隨機分為3組，即正常組（A組，n=10），高脂血癥相關(guān)性胰腺炎組（B組，n=10），

2、高脂血癥相關(guān)性胰腺炎+生長抑素組（C組，n=10）。2.A組:采用普通食料喂養(yǎng)。B組及C組:采用高脂食料（主要成份87.8％基礎飼料+10％豬油+2％膽固醇+0.2％膽酸鈉）喂養(yǎng)。A組腹腔注射生理鹽水用于對照。B組:腹腔注射雨蛙素聯(lián)合脂多糖構(gòu)建急性胰腺炎模型。C組:建立動物實驗模型后，皮下注射生長抑素進行干預。3.三組造模后每只小鼠在12小時分別經(jīng)摘除眼球取血約2ml，利用全自動生化分析儀器對血清標本中的血脂、血淀粉酶等進行測定。采用E

3、LISA法檢測血清細胞因子（TNF-α、IL-1等）的變化情況。4.取胰腺組織行HE染色，觀察胰腺病理學變化，并采用Grewal評分標準行病理評分分級。利用免疫組化檢測PI3K/PKB（磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B）表達活性和NF-κB（核因子）表達情況。以上收集的數(shù)據(jù)用mean±標準差（x±s）來對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學描述，分析采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，單因素方差分析(one-way anova)來比較兩組樣本的均數(shù)，P＜0.05，認

4、為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果:1.A、B、C組三組小鼠經(jīng)普通食料及高脂食料喂養(yǎng)后，B組及C組小鼠毛發(fā)比A組密集光亮，三組小鼠初始體重相比，P＜0.05，差異無統(tǒng)計學意義， B組與A組、C組與A組最終體重和體重增量相比，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計學意義。2.B組及C組血清TG（甘油三酯）、Tc（總膽固醇）和Amy（淀粉酶）較A組升高，使用生長抑素進行干預后， C組上述指標較未干預的B組淀粉酶降低，P＜0.05，差異均具有統(tǒng)計學意義

5、。3.采用ELISA法檢測血清細胞因子(TNF-α、IL-1)結(jié)果顯示:B組及C組水平明顯高于A組，經(jīng)生長抑素抑素干預后，C組水平低于B組，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計學意義。4.胰腺HE染色及評分顯示:B組及C組胰腺組織的病理評分高于A組，P＜0.05，表明AP模型建模成功。同時使用生長抑素進行干預實驗后，C組病理評分高于A組，而低于B組，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計學意義。5.胰腺免疫組化檢測PKB及NF-κB表達情況顯示:B組及C組與

6、A組小鼠比較兩種蛋白表達升高，B組及C組胰腺組織兩種蛋白免疫組化染色IHS評分均高于A組，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計學意義。C組胰腺組織兩蛋白免疫組化染色IHS評分低于B組，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義，提示生長抑素能夠下調(diào)高脂血癥相關(guān)性急性胰腺炎小鼠胰腺組織PKB及NF-κB蛋白的表達。
　　結(jié)論:1.高脂血癥相關(guān)性急性胰腺炎時炎癥反應的發(fā)生發(fā)展，可能與PI3K/PKB信號轉(zhuǎn)導通路通過上調(diào)核因子NF-KB，促進炎性介質(zhì)TNF-