脂質(zhì)體槲皮素對(duì)Pristane誘導(dǎo)的系統(tǒng)性紅斑狼瘡樣小鼠模型的效應(yīng).pdf

1、研究背景和目的：
　　系統(tǒng)性紅斑狼瘡作為一種自體免疫性皮膚病，發(fā)病率較高，涉及全身多個(gè)系統(tǒng)器官或組織，其中最常受累的器官是腎?；颊哐逯挟a(chǎn)生多種自身抗體，其中以ANA抗體、抗ds-DNA抗體、抗snRNP/Sm抗體為代表。目前SLE的主流治療藥物有糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑類等。這些激素及免疫抑制劑的主要作用有減低T、B淋巴細(xì)胞功能，減少特異性自身抗體生成，抑制細(xì)胞因子產(chǎn)生等。但是以上藥物的長期應(yīng)用不可避免的帶來一些嚴(yán)重毒副作用，如抑

2、制生殖系統(tǒng)功能，增加腫瘤發(fā)生率，破壞造血功能等，導(dǎo)致正常的機(jī)體免疫功能受損。已知近百種水果、蔬菜和中草藥中含有數(shù)量豐富的槲皮素。槲皮素及其衍生物最重要的生物活性有免疫調(diào)節(jié)，抑制炎癥等，同時(shí)能夠抑制補(bǔ)體過度激活，調(diào)節(jié)T細(xì)胞活化，減少B淋巴細(xì)胞生成自身抗體。其作為一種天然多酚類化合物幾乎沒有毒性，也沒有一般藥物的多種副作用，在疾病防治上明顯優(yōu)于其它藥物。目前尚無脂質(zhì)體槲皮素用于SLE防治的報(bào)道。本研究通過觀察脂質(zhì)體槲皮素對(duì)Pristane誘

3、導(dǎo)的SLE樣小鼠模型血清自身抗體表達(dá)水平及腎小球IgG蛋白沉積的影響，探討脂質(zhì)體槲皮素對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡的治療效應(yīng)。
　　方法：
　　24只健康BALB/c雌鼠，6-8周齡，SPF級(jí)，體質(zhì)量19±2g，隨機(jī)分為2組，即正常對(duì)照組（n=6只），造模組（n=18只）。造模組每只小鼠于實(shí)驗(yàn)第1天全部一次性腹腔注射Pristane0.5ml，正常對(duì)照組每只小鼠全部一次性腹腔注射生理鹽水0.5ml。第3個(gè)月末檢測造模組小鼠血清中ANA抗

4、體表達(dá)水平以鑒定造模是否成功。從第4個(gè)月起，將造模成功的小鼠隨機(jī)分為兩組，即模型組（SLE組）和脂質(zhì)體槲皮素組（LQ組），加上原來正常對(duì)照組（NC組）共三個(gè)組別。用苦味酸標(biāo)記各組小鼠，飼喂全價(jià)營養(yǎng)顆粒飼料，供給二級(jí)動(dòng)物飲水，全程均在河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心的IVC系統(tǒng)中詞養(yǎng)。給藥方案：脂質(zhì)體槲皮素組小鼠從第4個(gè)月起使用8號(hào)灌胃針頭按50mg·kg-1體重劑量給予脂質(zhì)體槲皮素，每日一次。治療期為5個(gè)月。第8個(gè)月末采集各組小鼠血清標(biāo)本，ELISA

5、法測定血清中三種自身抗體（ANA、抗dsDNA和抗snRNP/Sm抗體）的表達(dá)水平；另采集各組小鼠新鮮腎臟標(biāo)本并制作冰凍切片，經(jīng)羊多克隆抗小鼠IgG-FITC熒光抗體作用后，置于熒光顯微鏡下應(yīng)用525nm濾光波長觀察各組標(biāo)本熒光強(qiáng)度并采集圖像。
　　結(jié)果：
　　第3個(gè)月末造模組小鼠有1例死亡，共檢測到有14只小鼠血清中ANA抗體表達(dá)水平相較正常對(duì)照組平均表達(dá)水平明顯升高，p<0.05。第8個(gè)月末SLE組、LQ組及正常對(duì)照組小

6、鼠均無死亡。SLE組有4/7只小鼠(57％)出現(xiàn)紅斑，LQ組有1/7只小鼠(14%)出現(xiàn)紅斑；NC組均無皮膚紅斑出現(xiàn)，槲皮素治療組小鼠皮膚紅斑發(fā)生率低于SLE組，p<0.05。三組小鼠血清中ANA抗體（24.535±1.297,40.260±1.137,34.180±0.817）、Anti-dsDNA抗體(355.793±17.562,568.200±18.578,475.930±14.237)和Anti-snRNP/Sm抗體(14.8

7、02±0.824,21.965±0.675,18.970±0.376)表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=51.791,39.745,30.411,p<0.001)。與SLE組小鼠相比，脂質(zhì)體槲皮素組小鼠血清中三種自身抗體表達(dá)水平顯著降低，p<0.01，但仍明顯高于正常對(duì)照組，p<0.001。脂質(zhì)體槲皮素組小鼠腎小球IgG沉積免疫熒光強(qiáng)度相較SLE組明顯減弱，但仍強(qiáng)于正常對(duì)照組小鼠。
　　結(jié)論：
　　脂質(zhì)體槲皮素能夠降低Pris