苦參堿對表皮葡萄球菌密度感應系統(tǒng)AI-2信號分子的調(diào)控作用研究.pdf

1、長期以來抗生素在治療細菌感染方面發(fā)揮著無可替代的作用，但是由于濫用和不合理使用抗生素導致細菌產(chǎn)生了嚴重的耐藥性，甚至出現(xiàn)了多重耐藥菌株。隨著對細菌耐藥機制深入研究發(fā)現(xiàn)耐藥性與細菌生物被膜的產(chǎn)生有很大的關系，細菌一旦形成生物被膜，其對抗生素的耐藥性比浮游菌增加了1000倍以上。細菌密度感應系統(tǒng)在生物被膜形成過程中有重要的調(diào)控作用，其中AI-2信號分子扮演著重要的角色，因此密度感應信號分子是消除細菌生物被膜的新靶點。本研究以密度感應AI-2

2、信號分子為研究對象，探討其在表皮葡萄球菌生長過程中的生成規(guī)律以及藥物對AI-2分子的作用特點，為研究中藥消除細菌生物被膜的機制奠定基礎。
　　首先用不同的培養(yǎng)方式培養(yǎng)表皮葡萄球菌浮游和生物被膜兩種模式菌，分別用XTT法和分光光度計法測定生物被膜菌和浮游菌生長曲線;用實時熒光定量PCR法檢測兩種模式菌不同時間點luxS基因的轉(zhuǎn)錄水平;用哈維氏弧菌BB170作為報告菌株檢測兩種模式菌中AI-2分子的濃度，研究AI-2分子的濃度及l(fā)ux

3、S基因轉(zhuǎn)錄水平在兩種模式菌生長過程中的變化規(guī)律;重點研究以苦參堿為主的中藥和抗生素對生物被膜菌以及對兩種模式菌中AI-2分子的調(diào)控作用;研究月桂酸單甘油酯、壬酸及苦參堿與二者組成的復合物聯(lián)合使用對生物被膜菌及生物被膜菌AI-2分子的作用特點。
　　結果表明AI-2分子和luxS基因轉(zhuǎn)錄水平在兩種模式菌生長過程中有不同的變化規(guī)律:在浮游菌中AI-2分子變化規(guī)律和luxS基因轉(zhuǎn)錄水平與菌株生長呈正相關，在生物被膜菌中AI-2分子變化規(guī)

4、律與生物被膜生長規(guī)律基本一致，但是luxS基因相對表達量則與生物被膜生長呈負相關。將試驗藥物作用于兩種模式菌后發(fā)現(xiàn)藥物對AI-2分子有調(diào)控作用，藥物對浮游菌AI-2分子的抑制作用優(yōu)于對生物被膜菌AI-2分子的抑制作用，并且在兩種模式菌中中藥對AI-2分子的抑制作用優(yōu)于抗生素，試驗藥物對生物被膜菌有一定的抑制作用而且中藥的抑制作用更好。月桂酸單甘油酯和壬酸及二者組成的復合物對生物被膜菌及生物被膜菌AI-2分子有抑制作用，并且該復合物與苦參