PPARα-Bcl2信號誘導(dǎo)細胞凋亡.pdf

1、癌癥已成為當(dāng)前人類死亡的主要疾病，而全球癌癥發(fā)病率與死亡率呈持續(xù)上升趨勢，世界衛(wèi)生組織發(fā)布的報告顯示2012年全球有1400萬人被診斷患癌，罹患人數(shù)最多的3大癌癥分別是肺癌(180萬)、乳癌(170萬)、大腸癌(140萬)。每年全球有420萬人死于癌癥。在2012年，全球新增癌癥病例中超過50％的患者，來自亞洲，而他們中的大部分發(fā)生在中國。此外，中國也是新增肝癌病例的主要國家，由乙型肝炎引起的肝癌中國排在全球首位。因此，深入揭示癌癥發(fā)病

2、機制顯得越來越重要而緊迫，這將有助于開發(fā)更多而有效的癌癥治療藥物。PPARα屬于過氧化物酶體增殖劑激活受體（PPARs）家族中的一員，它在調(diào)節(jié)細胞增殖、凋亡、腫瘤發(fā)生等方面發(fā)揮重要作用。惡性腫瘤的主要特征是細胞異常增生并抑制細胞凋亡。Bcl2家族蛋白包括促進細胞存活蛋白（Bcl2， Bcl-xl， Mcl-1）及促進細胞凋亡蛋白(Bax， Bad， Bim)?；诖耍琍PARα與抗凋亡Bcl2家族蛋白相關(guān)性機制依然不清楚。本研究發(fā)現(xiàn)：P

3、PARα具有 E3泛素化連接酶新功能并誘導(dǎo)底物Bcl2蛋白泛素化、降解，從而增強化療藥物誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡并降低其存活率。顯著性發(fā)現(xiàn)如下：
　　1、PPARα只減少Bcl2蛋白水平，對其他抗凋亡蛋白Bcl-xl， Mcl-1的蛋白水平?jīng)]有顯著性影響。qPCR、RT-PCR分析結(jié)果表明PPARα對Bcl2基因表達水平并無影響。
　　2、利用體外泛素化分析發(fā)現(xiàn)PPARα具有E3泛素化連接酶的新功能，其誘導(dǎo)K48-鏈連接的多聚泛素的

4、形成。進一步體外泛素化分析發(fā)現(xiàn)PPARα誘導(dǎo)底物Bcl2泛素化。利用點突變技術(shù)分析并鑒定了C102氨基酸殘基是PPARα泛素化連接酶的關(guān)鍵酶活力位點。
　　3、利用免疫共沉淀方法分析表明：PPARα生理上與Bcl2蛋白相互綁定。利用點突變技術(shù)突變 PPARα/C102為 PPARα/C102A。免疫共沉淀分析表明：PPARα/C102位點是綁定Bcl2蛋白的關(guān)鍵位點。此外，利用結(jié)構(gòu)域缺失突變和免疫共沉淀分析發(fā)現(xiàn)PPARα綁定Bcl