神經(jīng)元性一氧化氮合酶在電針調(diào)節(jié)抑郁癥雙重狀態(tài)的作用研究.pdf

1、目的:初步探討神經(jīng)元性一氧化氮合酶(nNOS)對(duì)電針調(diào)節(jié)抑郁癥雙重狀態(tài)-焦慮和抑郁樣行為的影響。
　　方法:實(shí)驗(yàn)一:將SD大鼠(84只)隨機(jī)分為6組:正常組（1和2）、焦慮組、抑郁組、電針抗焦慮組和電針抗抑郁組。分別采用慢性溫和不可預(yù)知應(yīng)激(CUMS)7天和21天結(jié)合孤養(yǎng)方法制備焦慮和抑郁樣模型，正常組（1和2）不予任何干預(yù)，造模同時(shí)電針治療抗焦慮和抗抑郁組，選擇“百會(huì)”和“印堂”穴，頻率分別為100Hz和2Hz、電流強(qiáng)度約為1m

2、A，留針15min，每日一次，分別連續(xù)治療7天和21天。
　　實(shí)驗(yàn)二:將SD大鼠(24只)隨機(jī)分為3組:正常組(Control)、足底電擊組(FootshockFS)、電針抗足底電擊組(EA-FS)。采用足底電擊結(jié)合孤養(yǎng)的方法制備焦慮樣模型，電針“百會(huì)”和“印堂”穴，頻率100Hz，電流強(qiáng)度約為1mA，留針15min，每日1次，連續(xù)治療7天。
　　治療結(jié)束后，采用高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)（EPM評(píng)分）評(píng)價(jià)焦慮樣行為、開(kāi)野實(shí)驗(yàn)(Ope

3、n-field)、體重、糖水相對(duì)消耗量等評(píng)價(jià)抑郁樣行為，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、蛋白免疫印跡(Western-Blet)和免疫組化方法分別檢測(cè)各組大鼠海馬神經(jīng)元型一氧化氮合酶(Neuronal Nitric Oxide Synthase，nNOS)表達(dá)和CA3、CA1區(qū)蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:實(shí)驗(yàn)一:1.行為學(xué)測(cè)試:高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)（EPM評(píng)分）:與正常組1比較，大鼠接受CUMS7天后在開(kāi)臂/（開(kāi)臂+閉臂）的時(shí)間和次數(shù)

4、百分比顯著降低(P＜0.01)，電針能夠使其升高(P＜0.01);與正常組2比較，開(kāi)野實(shí)驗(yàn)(Open-field)中大鼠接受CUMS21天后其水平運(yùn)動(dòng)距離和中央探索次數(shù)百分比均顯著下降(P＜0.01)，電針能夠使其顯著性提高(P＜0.01);體重測(cè)量:與正常組2比較，造模第7天，抑郁組和電針抗抑郁組體重均有下降趨勢(shì)，但兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，第14、21天抑郁組體重減少(P＜0.01)，電針可以使其增加(P＜0.05);糖水相對(duì)消耗量實(shí)驗(yàn):

5、與正常組2比較，造模第7天，抑郁組糖水相對(duì)消耗量稍有下降，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，第14、21天抑郁組糖水相對(duì)消耗量降低(P＜0.01)，電針能夠使顯著升高(P＜0.05);2.RT-PCR顯示，焦慮和抑郁組海馬nNOS mRNA表達(dá)均低于正常組（1和2），電針均可以升高其表達(dá);3.蛋白免疫印跡(Western-Blet)顯示，焦慮和抑郁組海馬nNOS蛋白表達(dá)均低于正常組（1和2），電針均能夠升高其表達(dá);4.免疫組化顯示，與正常組（1和2）比較

6、，焦慮和抑郁組海馬CA3和CA1區(qū)nNOS平均光密度和累計(jì)光密度值均顯著降低(P＜0.05)，電針可以使其表達(dá)提高(P＜0.05);
　　實(shí)驗(yàn)二:1.行為學(xué)測(cè)試:高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)（EPM評(píng)分）:與正常組(Control)比較，大鼠接受足底電擊7天后在開(kāi)臂/（開(kāi)臂+閉臂）的時(shí)間和次數(shù)百分比顯著降低(P＜0.05)，電針能夠使其升高(P＜0.05);2.RT-PCR顯示，足底電擊組(FS)海馬nNOS mRNA表達(dá)高于正常組（Cont

7、rol），電針可以降低其表達(dá);3.免疫組化顯示，與正常組(Control)比較，足底電擊組(FS)海馬CA3區(qū)nNOS平均光密度和累計(jì)光密度值均顯著升高(P＜0.05)，電針可以使其恢復(fù)性下調(diào)(P＜0.05)，而CA1區(qū)nNOS平均光密度和累計(jì)光密度值均顯著降低(P＜0.01)，電針可以升高其表達(dá)(P＜0.01)。
　　結(jié)論:抑郁癥在不同的應(yīng)激時(shí)程—慢性應(yīng)激早期（CUMS7天）和晚期（CUMS21天）表現(xiàn)出不同的狀態(tài)，即焦慮和抑郁