自噬相關(guān)蛋白Beclin-1和p62在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的：
　　通過(guò)檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白Beclin-1及p62在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株及非小細(xì)胞肺癌患者組織中的表達(dá)情況，探討 Beclin-1及 p62的表達(dá)與肺癌患者臨床病理學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性及其作為一種新的腫瘤預(yù)后標(biāo)志物在肺癌預(yù)后判斷中的價(jià)值。
　　方法：
　　1.采用蛋白印跡技術(shù)（Western Blot）及免疫熒光染色法檢測(cè)Beclin-1及p62蛋白在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549、H1299、HCC827中的表達(dá)情況；

2、r>　　2.收集蘇州大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院胸外科2006年10月-2009年12月期間手術(shù)切除的非小細(xì)胞肺癌患者腫瘤組織128例。肺癌組織標(biāo)本經(jīng)4％多聚甲醛固定，并予石蠟包埋，制作組織芯片。采用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)128例肺癌組織中Beclin-1及p62蛋白的表達(dá)和分布。
　　3.分析肺癌組織中Beclin-1及p62蛋白的表達(dá)活性與患者臨床病理特征的相關(guān)性，探討B(tài)eclin-1及p62蛋白的表達(dá)與肺癌患者預(yù)后的關(guān)系。
　　

3、結(jié)果:
　　1. Western Blot結(jié)果顯示，Beclin-1及p62蛋白在非小細(xì)胞肺癌A549、H1299及HCC827細(xì)胞株中均有表達(dá)；細(xì)胞免疫熒光染色法可觀察到Beclin-1及p62蛋白主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。
　　2.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示：肺癌組織中 Beclin-1及 p62蛋白主要表達(dá)于肺癌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，其中Beclin-1高表達(dá)率為42.31%（44/104），p62高表達(dá)率為49.03%（51/10

4、4）。Beclin-1和p62蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)（P=0.001）。Beclin-1蛋白的表達(dá)活性與肺癌患者的性別（P=0.007）、吸煙指數(shù)（P=0.035）、腫瘤分化程度（P=0.01）及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P=0.000）相關(guān)，而與患者年齡、病理類型、有無(wú)COPD病史、TNM分期及CEA水平等無(wú)明顯的相關(guān)性（P>0.05）。p62蛋白的表達(dá)則與TNM分期（P=0.029）及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P=0.011）相關(guān)，與性

5、別、年齡、吸煙指數(shù)、有無(wú) COPD病史、病理類型、腫瘤分化程度及 CEA水平等無(wú)相關(guān)性（P>0.05）。
　　3.生存分析結(jié)果顯示：?jiǎn)我蛩谻ox回歸分析結(jié)果提示Beclin-1蛋白的低表達(dá)及p62蛋白的高表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者的差預(yù)后有顯著的相關(guān)性，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），且既往有COPD病史及 TNM分期高的患者預(yù)后亦差（P=0.014，P=0.000）。多因素Cox回歸分析結(jié)果顯示Beclin-1蛋白的低表達(dá)、p

6、62蛋白的高表達(dá)及TNM高分期均可作為非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后差的獨(dú)立標(biāo)記物（P=0.037，P<0.001，P=0.000）。
　　結(jié)論：
　　1.自噬相關(guān)蛋白 Beclin-1及 p62主要表達(dá)于非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，且Beclin-1和p62蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。
　　2.肺癌組織中 Beclin-1蛋白的表達(dá)與肺癌患者的性別及吸煙指數(shù)相關(guān)，提示肺部炎癥反應(yīng)可能誘導(dǎo)自噬的增強(qiáng)；其與腫瘤分化程度