HIC1抑制胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的作用機制研究.pdf

1、研究背景和目的：癌高甲基化基因(HIC1)是一個腫瘤抑制基因，在人類多種腫瘤組織中，HIC1經(jīng)常出現(xiàn)表達缺失或啟動子區(qū)域高甲基化表觀遺傳修飾而表達沉默的現(xiàn)象，這通常預(yù)示著腫瘤的不良預(yù)后。然而，HIC1在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用沒有闡明，特別在調(diào)控胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移能力的分子機制方面沒有報道。在本研究中，我們主要探索HIC1表達水平對胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響以及分子機制研究，并最終為胰腺癌尋求有效的治療靶點奠定基礎(chǔ)。
　　實驗方法與材料：

2、我們收集了手術(shù)后切除的胰腺癌組織和幾種常見的胰腺癌細胞系，運用免疫印跡和定量PCR的方法檢測了HIC1的mRNA和蛋白表達水平。然后，我們通過對胰腺癌組織芯片免疫組化染色的方法，評估HIC1的表達與胰腺癌病理特征的關(guān)聯(lián)，并全面統(tǒng)計分析了臨床病例資料，分析患者的生存與預(yù)后。進一步，我們通過過表達和RNAi干擾技術(shù)，在體內(nèi)體外水平，探討HIC1的表達水平對胰腺癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。最后，我們運用免疫共沉淀和激光共聚焦的技術(shù)，確定了HIC

3、1與STAT3的相互作用，并通過雙熒光素酶報告基因技術(shù)和ChIP-PCR技術(shù)，檢測HIC1對IL-6/STAT3信號通路的作用。
　　實驗結(jié)果：HIC1在胰腺癌組織和胰腺癌細胞系SW1990、ASPC-1、PANC-1、BXPC-3、MIAPACA-2中明顯表達下調(diào)或者沉默丟失。組織芯片顯示HIC1在腫瘤組織和癌旁組織中表達具有顯著性差異。HIC1的表達丟失與腫瘤的惡性程度和患者的不良預(yù)后明顯相關(guān)。體內(nèi)體外實驗證實，恢復(fù)HIC1的

4、表達能顯著抑制胰腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移能力，下調(diào) HIC1的表達能促進胰腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移。HIC1與STAT3相互結(jié)合形成復(fù)合物，抑制STAT3轉(zhuǎn)錄活性，從而抑制 IL-6/STAT3信號通路下游靶基因c-Myc，VEGF，Cyclin D1，MMP2，MMP9的表達。
　　結(jié)論：HIC1是IL-6/STAT3信號通路的負性調(diào)節(jié)因子。HIC1抑制胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移主要與其抑制STAT3信號通路侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)關(guān)鍵基因(c-Myc、Cyclin D1