MiR-126調(diào)控cofiliN-1與上皮性卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究.pdf

1、研究目的:
　　卵巢癌因其進(jìn)展迅速，容易腹腔內(nèi)廣泛轉(zhuǎn)移，因此在確診時(shí)多數(shù)患者已處于晚期，目前已經(jīng)成為婦科致死率最高的腫瘤之一。卵巢癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為強(qiáng)，大部分患者接受標(biāo)準(zhǔn)化治療后2年左右出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)及耐藥，因此晚期卵巢癌患者5年生存率較低。近年來(lái)研究表明各種miRNA可通過作用于mRNA轉(zhuǎn)錄后水平在腫瘤發(fā)生發(fā)展中起到抑癌或促癌作用。對(duì)于miR-126，有研究表明在乳腺癌、肺癌、前列腺癌等多種腫瘤發(fā)生發(fā)展中起著抑癌基因的作用，但其

2、在卵巢癌中的作用尚不明確。絲切蛋白(Cofilin)是一種肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白，在細(xì)胞骨架重塑和移動(dòng)調(diào)節(jié)上起著重要作用，而卵巢癌等惡性腫瘤細(xì)胞的分裂、遷移及特異性結(jié)構(gòu)依賴于細(xì)胞骨架的動(dòng)力學(xué)調(diào)節(jié)。為此本研究擬通過體外培養(yǎng)SKOV3卵巢癌細(xì)胞株并轉(zhuǎn)染不同miR-126基因片段，比較miR-126與Cofilin-1表達(dá)之間的關(guān)系，以此研究miR-126是否可通過調(diào)控conflin-1而參與卵巢癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移的調(diào)節(jié)。
　　研究方法:

3、>　　本研究將人卵巢漿液性囊腺癌SKOV3細(xì)胞株進(jìn)行體外培養(yǎng)，miR-126通過慢病毒的包裝后轉(zhuǎn)染人卵巢漿液性囊腺癌SKOV3細(xì)胞系，上述卵巢癌細(xì)胞分成四組，分別為:miR-126過表達(dá)組（SKOV3+LV3-has-miR-126組）、miR-126抑制表達(dá)組（SKOV3+LV3-has-miR-126 inhibitor組）、轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照組(SKOV3+LV3NC組)和空白對(duì)照組（SKOV3組），實(shí)驗(yàn)采用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)觀

4、察各組細(xì)胞的侵襲能力，通過免疫熒光法觀察cofilin-1表達(dá)水平的差異。
　　研究結(jié)果:
　　1.Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)的結(jié)論表明miR-126過表達(dá)組(SKOV3+LV3-has-miR-126組SKOV3細(xì)胞侵犯基質(zhì)膠的穿膜細(xì)胞數(shù)明顯少于miR-126抑制表達(dá)組（SKOV3+LV3-has-miR-126 inhibitor組）(P＜0.05)，同時(shí)也明顯少于轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照組（SKOV3+LV3NC組）和空白對(duì)照組（

5、SKOV3組）的穿膜細(xì)胞數(shù)（P均＜0.05）。
　　2.免疫熒光檢測(cè)結(jié)果顯示，LV3-has-miR-126組細(xì)胞Cofilin-1表達(dá)明顯低于miR-126抑制表達(dá)組（SKOV3+LV3-has-miR-126 inhibitor組）、轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照組（SKOV3+LV3NC組）和空白對(duì)照組（SKOV3組），而LV3-has-miR-126 inhibitor組Cofilin-1表達(dá)明顯高于轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照組（SKOV3+LV3NC組