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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察補(bǔ)腎健脾,解毒利咽法對(duì)IgA腎病模型大鼠IFN-γ、IL-4的影響,探討該法治療IgA腎病的作用機(jī)制,為臨床治療提供可靠的實(shí)驗(yàn)學(xué)依據(jù)。
方法:選取80只雄性健康清潔級(jí)Wistar大鼠,體重200±20g,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,用分層隨機(jī)的方法將大鼠分為空白組10只,造模組70只。造模組采用口服牛血清白蛋白(Bevine serum albumin,BSA)、尾靜脈注射脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)
2、、皮下注射四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCL4),制備IgA腎病模型大鼠。模型制備成功后,將造模組分為模型組、雷公藤多甙組、補(bǔ)腎健脾,解毒利咽中藥高、中、低劑量組。給予雷公藤多甙組予6mg/(kg.d)灌胃;予補(bǔ)腎健脾,解毒利咽中藥低劑量組4ml/(kg·d)灌胃,含生藥量8g/kg、中劑量組4ml/(kg·d)灌胃,含生藥量16g/kg、高劑量組中藥湯劑4ml/(kg·d)灌胃,含生藥量32g/kg灌胃;空白組
3、及模型組每天給予生理鹽水灌胃,4ml/只。共給藥8周。
觀察指標(biāo):(1)大鼠的一般狀態(tài);(2)檢測(cè)各組大鼠24小時(shí)尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及24小時(shí)尿蛋白尿定量的改變;(3)檢測(cè)大鼠血清腎功能、肝功能的改變;(4)采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法測(cè)定腎臟組織中IFN-γ、IL-4的含量;(5)采用免疫組化法觀察IFN-γ、IL-4在腎組織中的定位表達(dá);(6)采用熒光免
4、疫方法檢測(cè)IgA復(fù)合物在腎組織中的沉積。
結(jié)果:
?。?)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中大鼠共死亡22只,其中驗(yàn)證模型處死10只大鼠,造模過(guò)程中死亡8只,治療過(guò)程中死亡4只(其中雷公藤對(duì)照組死亡3只,中藥低劑量組死亡1只)。(2)空白組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一般狀態(tài)較好,無(wú)明顯異常。各模型組大鼠給予四氯化碳皮下注射后表現(xiàn)為精神萎靡,出現(xiàn)不同程度的毛發(fā)雜亂不光澤,口鼻血性分泌物,腹瀉,體重下降等表現(xiàn)。經(jīng)過(guò)治療2~3周后各治療組大鼠一般狀態(tài)好轉(zhuǎn)
5、,腹瀉癥狀減少,體重增加。(3)空白組大鼠無(wú)血尿及蛋白尿癥狀出現(xiàn),造模組大鼠24小時(shí)尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及24小時(shí)尿蛋白定量明顯升高,各治療組大鼠有所下降(P<0.05),組間比較治療組與雷公藤多甙對(duì)照組無(wú)明顯差異(P>0.05)。(4)IgA腎病模型大鼠腎組織中 IFN-γ的水平與空白組比較明顯下降,IL-4的水平明顯升高。(5)各治療組大鼠經(jīng)治療后 IFN-γ水平明顯上調(diào)(P<0.05),IL-4的水平明顯下調(diào)(P<0.05),組間比較,補(bǔ)
6、腎健脾,解毒利咽高、中低劑量組及雷公藤多甙對(duì)照組比較無(wú)明顯差異(P>0.05)。(6)各組大鼠腎功能及肝功能比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),但雷公藤多甙組出現(xiàn)2例明顯的肝損傷事件。
結(jié)論:
?。?)采用牛血清白蛋白灌胃及四氯化碳、脂多糖注射的方法能成功復(fù)制IgA腎病動(dòng)物模型。
?。?)雷公藤多甙對(duì)照組及補(bǔ)腎健脾,解毒利咽組均能有效降低IgA腎病模型大鼠24小時(shí)尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及24小時(shí)尿蛋白排泄率。
?。?/p>
7、3)IgA腎病模型大鼠腎組織中IFN-γ的水平與空白組比較明顯下降,經(jīng)給藥治療后IFN-γ的水平明顯回升,與病情呈正相關(guān);IgA腎病模型大鼠腎組織中IL-4的水平與空白組比較明顯升高,經(jīng)給藥治療后IL-4的水平有所下調(diào),與病情呈負(fù)相關(guān);說(shuō)明IFN-γ、IL-4的異常表達(dá)參與了IgA腎病的發(fā)病,從而導(dǎo)致IgA腎病的發(fā)生。
?。?)各治療組比較,補(bǔ)腎健脾,解毒利咽方藥可能的機(jī)制是通過(guò)調(diào)節(jié)IgAN模型大鼠腎組織中Th類細(xì)胞因子IFN-
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