2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、“三高”即高血脂、高血壓和高血糖,被稱為人類健康的“無(wú)形殺手”,其中高血脂不僅可導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化、脂肪肝、冠心病等心血管疾病,而且與高血壓、高血糖等相關(guān)疾病關(guān)系密切,嚴(yán)重威脅人類健康。高脂血癥主要是由血漿中甘油三酯(triglyceride,TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)和類脂(lipid,LP)含量持續(xù)過(guò)高引發(fā),其中 TG影響尤為突出。TG被脂肪水解酶(簡(jiǎn)稱脂肪酶,lipase)在腸粘膜細(xì)胞內(nèi)水解生成甘油

2、(甘油二酯或單酯)和脂肪酸,大量的脂肪酸在脂肪合成酶作用下,在肝臟中再次形成TG,從而引起血脂水平上升。同時(shí),細(xì)胞代謝會(huì)產(chǎn)生大量自由基,而血液中過(guò)量的自由基更易通過(guò)氧化或修飾脂蛋白膽固醇,使脂質(zhì)水平上升。已有研究表明,具有強(qiáng)自由基清除能力的抗氧化活性化合物黃酮和多酚類物質(zhì),可通過(guò)抑制TG合成過(guò)程中關(guān)鍵酶的催化活性,下調(diào)血清中TG水平,從而達(dá)到降血脂目的。
  國(guó)內(nèi)外大量研究證實(shí),桑樹(shù)各部位的提取物均具有降血脂功效。其中,桑葉、桑根

3、和桑椹的報(bào)道較多,但關(guān)于桑枝抑制脂肪酶活性的研究,特別是在脂肪酶活性跟蹤下,從桑枝中分離出具有抑制脂肪酶作用的活性物質(zhì)的研究鮮有報(bào)道。研究表明,逆境環(huán)境(過(guò)酸過(guò)堿、干旱脅迫等)或誘導(dǎo)處理(物理誘導(dǎo)、化學(xué)誘導(dǎo)、生物誘導(dǎo)等)會(huì)影響植物部分次生代謝產(chǎn)物的含量和種類,故本論文旨在對(duì)誘導(dǎo)處理后的桑枝進(jìn)行降血脂活性研究,并在抑制脂肪酶活性跟蹤下,尋找天然的脂肪酶抑制劑,以期為桑資源的開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù),為開(kāi)發(fā)降血脂藥物提供新思路。具體研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如

4、下:
  1桑枝降血脂活性部分的篩選
  為了科學(xué)、快速定位降血脂活性萃取部分,本研究對(duì)誘導(dǎo)后桑枝粗提物各萃取部分進(jìn)行了總多酚、總黃酮含量測(cè)定,及抑制脂肪酶、降膽固醇、清除 DPPH自由基(DPPH?)清除力、保護(hù)DNA潛力等降血脂相關(guān)活性的測(cè)試,結(jié)果表明各萃取部分差異明顯。桑枝粗提物的乙酸乙酯萃取部分(TEE)的多酚與黃酮總含量(247.79 mg/g)顯著高于石油醚萃取部分(TPE)(57.19 mg/g)、正丁醇萃取部

5、分(TBE)(138.20 mg/g)和剩余水相部分(TWE)(43.15 mg/g)(P<0.05);TEE(IC50為1.06±0.08 mg/mL)對(duì)脂肪酶抑制作用顯著強(qiáng)于TPE(IC50>12.80 mg/mL)、TBE(IC50為6.39±0.98 mg/mL)和TWE(IC50為11.21±1.98 mg/mL)(P<0.05);對(duì)清除DPPH?的能力(IC50為0.24±0.01 mg/mL)也遠(yuǎn)強(qiáng)于TPE(IC50為0.

6、77±0.10 mg/mL)、TBE(IC50為10.35±1.12 mg/mL)和TWE(IC50為12.18±1.80 mg/mL)(P<0.05)。結(jié)果表明:TEE各降血脂相關(guān)活性均最佳。
  2抑制脂肪酶活性成分的分離與鑒定
  為了直接定位降血脂活性成分,本研究在抑制脂肪酶活性跟蹤下,對(duì)TEE中具有脂肪酶抑制活性的成分進(jìn)行分離鑒定。首先,基于不同填料的柱色譜(硅膠柱色譜、氧化鋁柱色譜、Sephadex LH-20凝

7、膠柱色譜)及重結(jié)晶等分離手段,在薄層層析-自顯影技術(shù)(TLC-自顯影技術(shù))和脂肪酶抑制活性的跟蹤下,通過(guò)高通量篩選法,結(jié)合TLC-自顯影技術(shù),從TEE(85.6 g)中分離得到6個(gè)具有顯著脂肪酶抑制活性的化合物。其次,基于理化性質(zhì)分析結(jié)果,利用TLC、高效液相色譜(HPLC)法,將所分離得到的活性物質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比對(duì),應(yīng)用核磁共振(NMR)、質(zhì)譜(MS)進(jìn)行結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)分析。最終確定 MT4~7分別為蘆丁、槲皮素、桑色素、氧化白藜蘆醇, M

8、T1、MT’2結(jié)構(gòu)有待進(jìn)一步分析確定。
  3單體化合物抑制脂肪酶活性檢測(cè)及活性機(jī)制初探
  首先,由MT1、MT’2、蘆丁、槲皮素、桑色素和氧化白藜蘆醇的脂肪酶抑制活性檢測(cè)結(jié)果分析可知:MT’2的抑制作用最強(qiáng)(IC50為0.12 mg/mL),其次為槲皮素(IC50為2.04 mg/mL)、MT1(IC50為0.99 mg/mL)、蘆丁(IC50為1.89 mg/mL)、桑色素(IC50為2.19 mg/mL)以及氧化白藜

9、蘆醇(IC50為13.80 mg/mL)。
  其次,應(yīng)用AutoDock程序,采用分子對(duì)接手段,尋找槲皮素和脂肪酶合理的構(gòu)象和取向,得出槲皮素與脂肪酶是通過(guò)氫鍵結(jié)合,即1)槲皮素5-OH的H原子與脂肪酶ASP-248的H形成氫鍵,距離為2.8?;2)槲皮素7-OH的H原子分別與脂肪酶ASP-332和ARG-266殘基中的O形成兩個(gè)氫鍵,鍵長(zhǎng)分別為2.2?和2.3?;3)槲皮素7-OH的O原子則與脂肪酶LYS-240的H形成氫鍵,

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