聚(2-甲基-2-噁唑啉)涂層用于對乙酰氨基酚與牛血清白蛋白相互作用的研究.pdf

1、藥物與血清白蛋白之間的相互作用決定著藥物在體內(nèi)的有效濃度，影響著藥物在體內(nèi)的藥代動力學(xué)和藥效學(xué)性質(zhì)，因此藥物與血清白蛋白相互作用是藥物研發(fā)階段需要考察的重要性質(zhì)之一。目前常用來研究藥物與血清白蛋白相互作用的方法有熒光光譜法、高效液相色譜法和毛細管電泳方法等，其中毛細管電泳法因分離效率高、成本低、樣品消耗量少等優(yōu)點而備受關(guān)注。但毛細管電泳法中蛋白質(zhì)在毛細管內(nèi)壁的非特異性吸附是一個亟待解決的問題，因為蛋白質(zhì)的非特異性吸附不僅會影響峰形、降低

2、分離效率，而且會干擾目標(biāo)體系的相互作用，對結(jié)果產(chǎn)生不利影響。基于上述考慮本研究工作擬通過聚多巴胺(polydopamine，PDA)輔助共沉積法制備基于聚（2-甲基-2-噁唑啉）(poly(2-methyl-2-oxazole)，PMOXA）的抗蛋白質(zhì)吸附的涂層毛細管，并將該涂層毛細管用于前沿分析毛細管電泳（frontal analysis capillary electrophoresis，F(xiàn)ACE）法測定對乙酰氨基酚（acetami

3、nophen，APAP）與牛血清白蛋白(bovine serumalbumin，BSA)的相互作用參數(shù)。
　　本研究首先合成了星形聚合物聚乙烯亞胺-接枝-聚（2-甲基-2-噁唑啉）(poly(ethylene imine)-graft-poly(2-methyl-2-oxazoline),PEI-g-PMOXA），并通過PDA輔助共沉積在熔融硅毛細管內(nèi)壁形成PEI-g-MOXA與PDA復(fù)合的聚合物涂層，即PEI-g-PMOXA/P

4、DA涂層。SEM實驗結(jié)果表明PEI-g-PMOXA參與了PDA的沉積過程，涂層管內(nèi)表面的電滲流性質(zhì)也證實了在毛細管內(nèi)壁形成了PEI-g-PMOXA/PDA涂層。
　　由此形成的PEI-g-PMOXA/PDA涂層管用于分離4種模型堿性蛋白質(zhì)（細胞色素c、溶菌酶、α胰凝乳蛋白酶原A和核糖核酸酶A），所得峰的理論塔板數(shù)達105量級，約是裸管分離結(jié)果的10倍;而且連續(xù)分離30次，4種蛋白質(zhì)的遷移時間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于0.7％，

5、遠小于在裸管中的結(jié)果(約5.7％)，說明PEI-g-PMOXA/PDA涂層管具有良好的穩(wěn)定性和優(yōu)異的抗蛋白質(zhì)吸附性能。
　　基于其良好的穩(wěn)定性和抗蛋白質(zhì)吸附性能，PEI-g-PMOXA/PDA涂層管被用于FACE法測定APAP與BSA之間相互作用的參數(shù)，在25℃、25 mMTris/HCl緩沖溶液(pH7.4)中測得二者之間的結(jié)合常數(shù)（Ka）為1.39×104 M-1，結(jié)合位點數(shù)(n)為1.08。重復(fù)性實驗中，連續(xù)3次分析Ka和n