CX43基因在肺血減少型先天性心臟病中的表達及突變研究.pdf

1、目的：通過研究CX43基因在肺血減少型先天性心臟?。–ongenital Heart Disease，CHD）患者中的表達變化及突變，初步探討CX43基因在肺血減少型CHD發(fā)病機制中的作用，進一步研究CHD的可能發(fā)病機制。
　　方法：實驗組：收集蚌埠醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院與安徽省立兒童醫(yī)院心臟外科2013年4月至2014年10月治療的63例肺血減少型CHD患者術中切除右室流出道異常肥厚心肌組織，留取大小為5×5×5mm3，年齡在6個月

2、-14歲，平均年齡為5.09±3.27歲。對照組：收集蚌埠醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院與安徽省立兒童醫(yī)院心臟外科2013年5月至2014年10月治療的60例非肺血減少型CHD患者術中留取右室流出道或右室內異常肌束組織，大小為5×5×5mm3，年齡在6個月-14歲，平均年齡為5.95±2.53歲。應用免疫組織化學法檢測CX43蛋白在肺血減少型CHD患者中的表達水平；提取心肌組織mRNA，應用實時熒光定量聚合酶鏈反應技術（Real-time Quan

3、titative Polymerase Chain Reaction，RT-qPCR）檢測兩組心肌中的CX43基因mRNA表達變化并進行統(tǒng)計學分析；采用聚合酶鏈反應技術（Polymerase Chain Reaction，PCR）結合DNA測序技術檢測CX43基因的外顯子序列并比對，分析CX43基因突變與肺血減少型先心病的發(fā)生是否有關。
　　結果：
　　1.應用免疫組織化學法處理后發(fā)現(xiàn)：實驗組肺血減少型CHD患兒心肌CX43

4、蛋白水平表達明顯高于對照組，而且實驗組的CX43蛋白不規(guī)則地紊亂分布于胞漿。
　　2.應用實時熒光定量PCR方法：設定內參為1，實驗組心肌中CX43基因mRNA表達的相對定量為2.616±0.065，表明實驗組心肌中CX43 mRNA表達水平升高，應用SPSS18.0軟件進行t檢驗，結果顯示兩組之間表達水平的組間差異（p＜0.05），表明兩組之間表達水平的差異具有統(tǒng)計學意義。
　　3.采用PCR結合DNA測序技術，測序結果沒