2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討微小RNA-4284(MicroRNA-4284簡稱miR-4284)在下肢動(dòng)脈硬化閉塞癥(Arteriosclerosis obliterans,ASO)患者血漿和病變血管中的表達(dá)量變化特點(diǎn);探討在缺血清缺氧狀態(tài)下miR-4284在動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、遷移及凋亡中的作用。
  方法:臨床試驗(yàn):收集西南醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院血管甲狀腺外科2014-2015年間收治的55例下肢ASO患者和54例健康對(duì)照者血漿,24例下肢AS

2、O截肢患者的病變血管及24例外傷截肢患者正常血管。選取其中3對(duì)年齡及性別相近的下肢ASO患者和正常健康人血漿用microarray篩選出下肢ASO患者血漿與正常健康人血漿中相比較表達(dá)差異在2倍以上的24種MicroRNAs(miRNAs),用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)臨床55例下肢ASO患者和54例健康對(duì)照人群血漿中miR-4284的表達(dá)量,24例下肢ASO截肢患者病變血管和24例正常血管中miR-4284的表達(dá)量;按Fontaine分期將

3、55例下肢ASO患者分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期,用RT-qPCR分別檢測(cè)各期患者血漿中miR-4284的表達(dá)量。細(xì)胞實(shí)驗(yàn):正常培養(yǎng)主動(dòng)脈平滑肌、臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞后,再進(jìn)行缺血清缺氧處理用以模擬臨床ASO患者下肢缺血缺氧的狀態(tài)。用高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞再進(jìn)行缺血清缺氧處理,用以模擬臨床ASO合并Ⅱ型糖尿病患者。采用RT-qPCR檢測(cè)各組細(xì)胞中miR-4284的相對(duì)表達(dá)量;分別上調(diào)、下調(diào)miR-4284后通過cck8檢測(cè)細(xì)胞增殖、transw

4、ell檢測(cè)細(xì)胞遷移,流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡,蛋白印跡檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白XIAP、BCL2、BAX的表達(dá)。
  結(jié)果:臨床試驗(yàn)顯示,與健康對(duì)照組相比下肢ASO患者血漿中miR-4284的表達(dá)量在Fontaine第Ⅰ期中就開始顯著升高,并在第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期血漿中一直持續(xù)在高水平狀態(tài);下肢ASO患者病變血管與正常血管相比,病變血管中miR-4284的表達(dá)量也明顯升高;細(xì)胞試驗(yàn):臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞在低糖及高糖缺血清缺氧的條件下miR-4284的表達(dá)量均

5、升高;主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞在缺血清缺氧的條件下miR-4284表達(dá)量降低;主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞在缺血清缺氧的條件下,上調(diào)、下調(diào)miR-4284,對(duì)細(xì)胞的增殖、遷移沒有太大影響;在不進(jìn)行缺血清缺氧處理的主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中,上調(diào)、下調(diào)miR-4284對(duì)細(xì)胞凋亡沒有太大影響;在缺血清缺氧的主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中上調(diào)miR-4284的表達(dá)對(duì)細(xì)胞的凋亡沒有太大影響,但下調(diào)miR-4284的表達(dá)能抑制主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡;抑制凋亡相關(guān)蛋白XIAP、BCL2在下

6、調(diào)miR-4284后表達(dá)量明顯升高,促凋亡相關(guān)蛋白BAX在下調(diào)miR-4284后表達(dá)量明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  結(jié)論:miR-4284在下肢ASO患者血漿和血管組織中表達(dá)量明顯升高;缺血清缺氧誘導(dǎo)主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中miR-4284表達(dá)明顯降低,缺血清缺氧誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中miR-4284表達(dá)明顯升高;miR-4284對(duì)平滑肌細(xì)胞增殖、遷移作用不大;下調(diào)miR-4284可以抑制平滑肌細(xì)胞凋亡,調(diào)控miR-4284有望成為

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