高頻微秒電脈沖用于腫瘤消融的研究.pdf

1、癌是指起源于上皮細胞的惡性腫瘤，是人類健康的三大殺手之一。目前臨床對于癌癥的治療方法主要有傳統(tǒng)的手術(shù)切除，放射治療和化學治療，然而這些方法給患者的身體和精神都帶來很大傷害；新型微創(chuàng)手法如射頻消融、微波消融、冷凍消融和聚焦超聲消融等又由于其熱沉效應(yīng)，在腫瘤消融時會對周圍組織或臟器造成傷害而存在局限性；不可逆電穿孔（IRE，Irreversible electroporation）是一種非熱效應(yīng)的腫瘤消融方式，可以對膽管及血管周圍的腫瘤進行

2、消融，在臨床受到越來越多的關(guān)注。
　　本研究在傳統(tǒng)不可逆電穿孔的基礎(chǔ)上將電脈沖加以改進，運用頻率增大的高頻脈沖，與正負極交替的雙極性脈沖，理論上可以改善傳統(tǒng)不可逆電穿孔脈沖在臨床治療時存在的問題。實驗從生物角度出發(fā)，分別在細胞、組織與動物實體瘤的水平探究了高頻單極性脈沖與高頻雙極性脈沖運用于腫瘤消融的殺傷效果，研究結(jié)果可以促進兩種新型脈沖的臨床應(yīng)用。對于高頻單極性脈沖，用MTT檢測電脈沖刺激后的正常表皮細胞與黑色素瘤細胞，通過相對

3、活細胞量判斷不同頻率脈沖的殺傷效果；用Annexin V-FITC/PI染色的流式細胞術(shù)檢測電刺激后的細胞，探究不同頻率及不同電場強度電脈沖作用下的細胞死亡途徑；用細胞膜熒光探針DiI染色，觀察脈沖作用下的細胞膜穿孔情況。對于高頻雙極性脈沖，用CCK-8檢測電脈沖刺激后的細胞，判斷不同頻率及不同占空比脈沖的殺傷效果；用Annexin V-FITC/PI染色的流式細胞術(shù)檢測電刺激后的細胞，探究不同頻率及不同電場強度電脈沖作用下的細胞死亡途

4、徑；對家兔的肝施加電刺激，用石蠟切片與H&E染色法觀測不同頻率的脈沖在組織的電場分布。建立裸鼠荷瘤模型，用傳統(tǒng)IRE脈沖及兩種高頻脈沖刺激腫瘤，H&E染色及測量確定腫瘤消融情況。結(jié)果表明：總能量相同的前提下，高頻脈沖的殺傷效果隨脈沖寬度的增大而增大，隨電場強度的增大而增大，與占空比的大小沒有關(guān)系；高頻單極性微秒脈沖與高頻雙極性微秒脈沖可以達到與傳統(tǒng)脈沖相同的殺傷效果，傳統(tǒng)不可逆電穿孔脈沖（IRE）與高頻單極性微秒脈沖作主要使細胞發(fā)生壞死