異黃酮類抗氧劑與DNA相互作用的光譜與電化學(xué)研究.pdf

1、DNA（脫氧核糖核酸）是生物體內(nèi)生命信息傳遞的物質(zhì)基礎(chǔ)，是生物遺傳信息的攜帶者，對(duì)物種的生存以及生態(tài)環(huán)境的安全有著極其重要的意義。小分子與DNA的作用，會(huì)影響DNA的結(jié)構(gòu)以及生理功能，甚至改變DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，因此，關(guān)于小分子與DNA的作用方式和作用機(jī)理的研究，在探索藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特征、開發(fā)新的核酸探針方面具有重要的意義，同時(shí)也為設(shè)計(jì)以DNA為作用靶標(biāo)的藥物分子、藥物篩選提供理論指導(dǎo)。本文主要以毛蕊異黃酮（CYS）和刺芒柄花素（FN

2、）為研究對(duì)象，初步探討了兩種異黃酮類抗氧劑與DNA的相互作用。本論文的主要內(nèi)容包括：
　　1.采用光譜法和電化學(xué)方法研究了毛蕊異黃酮與DNA的作用。CYS與DNA作用后的紫外-可見吸收光譜，表現(xiàn)出一定的減色效應(yīng)，其熒光光譜則表現(xiàn)出增色效應(yīng)，表明兩者能夠發(fā)生相互作用。電化學(xué)研究表明在pH4.4的HAc-NaAc緩沖溶液中，CYS在金電極上有一對(duì)氧化還原峰，CYS的氧化峰電流與其濃度在0.35~7.04μmol/L和7.04~70.3

3、6μmol/L的濃度范圍內(nèi)，呈良好的線性關(guān)系。線性方程分別為：CYS與DNA作用后，CYS的氧化峰電流顯著減小，峰電位發(fā)生正移。根據(jù)DNA加入前后，峰電流及峰電位的變化，計(jì)算了CYS與DNA相互作用前后的動(dòng)力學(xué)參數(shù)，如電子轉(zhuǎn)移數(shù)（n）、電子轉(zhuǎn)移系數(shù)（α）、電極反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)速率常數(shù)(ks)以及兩者相互作用的結(jié)合比（m）和結(jié)合常數(shù)（β）。
　　2.首次研究了刺芒柄花素（ FN）在聚 L-半胱氨酸修飾的玻碳電極（PLC/GCE）上的電化學(xué)行

4、為，發(fā)現(xiàn)FN在裸玻碳電極（GCE）上不能產(chǎn)生明顯的氧化還原信號(hào)，但在PLC/GCE上有一對(duì)準(zhǔn)可逆氧化還原峰，說明該修飾電極對(duì)刺芒柄花素有良好的催化效果。實(shí)驗(yàn)探討了聚合電位、聚合掃描圈數(shù)、支持電解質(zhì)種類及酸度、掃描速度等對(duì)刺芒柄花素電化學(xué)信號(hào)的影響；利用差分脈沖伏安法（DPV）測(cè)定了FN的線性范圍。結(jié)果表明，ipa與CFN在0.75~60μmol/L的濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，其線性回歸方程為：ipa(μA)=0.1118+0.0039

5、 CFN(μmol/L)，r=0.999。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，采用光譜法和電化學(xué)方法研究了刺芒柄花素與DNA的相互作用。發(fā)現(xiàn)FN與DNA作用后的紫外-可見吸收光譜，表現(xiàn)出一定的減色效應(yīng)，而其熒光光譜則表現(xiàn)出增色效應(yīng)，表明兩者能夠發(fā)生相互作用；電化學(xué)結(jié)果顯示，F(xiàn)N與DNA作用后，F(xiàn)N的氧化峰電流明顯減小，且峰電位發(fā)生正移；可知刺芒柄花素通過嵌插作用與DNA結(jié)合，根據(jù)DNA加入前后，刺芒柄花素氧化峰電流和峰電位的變化，計(jì)算出FN與DNA相互作