醫(yī)學微生物學厭氧性細菌-上海交通大學

1、第11章 厭氧性細菌,（anaerobic bacteria）,概述,必須在無氧環(huán)境下，才能生長繁殖根據(jù)能否形成芽胞，可分為厭氧芽胞梭菌屬無芽胞厭氧菌,第一節(jié) 厭氧芽胞梭菌屬,(Clostridium),概述,嚴格厭氧菌，革蘭陽性芽胞比菌體粗，菌體膨大呈梭狀，抵抗力強周鞭毛，無莢膜（除產氣莢膜梭菌外）致病菌產生外毒素致病，病情嚴重防治：類毒素與抗毒素,一、破傷風梭菌,（C．tetani）,破傷風（tetanus）的病原

2、菌,生物學性狀,形態(tài)與染色菌體細長，芽胞正圓，位于菌體頂端，使細菌呈鼓槌狀培養(yǎng)特性和生化反應血平板上，有β溶血,生物學性狀,抵抗力芽胞抵抗力很強75~80℃ 10min仍保持活力在干燥的土壤和塵埃中可存活數(shù)年,致病性與免疫性,所致疾病-破傷風,致病條件,傷口需形成厭氧微環(huán)境傷口窄而深（如刺傷），有泥土或異物污染大面積創(chuàng)傷、燒傷，壞死組織多，局部組織缺血有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染的傷口無侵襲力，僅在局部繁殖，其致病

3、作用完全有賴于病菌所產生的外毒素,致病因子,對氧敏感的破傷風溶血毒素(tetanolysin) 質粒編碼的破傷風痙攣毒素(tetanospasmin)屬神經(jīng)毒(neurotoxin)，毒性極強(對人致死量<1µg)蛋白質，不耐熱,破傷風痙攣毒素,結構菌體：一條多肽釋出菌體：輕鏈（A鏈）-S-S-重鏈（B鏈）B鏈：神經(jīng)節(jié)苷脂結合的單位A鏈：毒性作用,破傷風痙攣毒素作用機制,與神經(jīng)系統(tǒng)的結合B鏈識別運動神經(jīng)元

4、外胞漿膜上的受體并結合，促使毒素進入細胞內小泡中內在化作用小泡從外周神經(jīng)末稍沿神經(jīng)軸突逆行向上，到達運動神經(jīng)元細胞體，進入傳入神經(jīng)末稍，最終進入中樞神經(jīng)系統(tǒng),破傷風痙攣毒素作用機制,膜的轉位通過重鏈N端的介導產生膜的轉位使輕鏈進入胞質溶膠胞質溶膠中作用靶的改變A鏈發(fā)揮毒性作用，使儲存抑制性神經(jīng)介質小泡膜蛋白發(fā)生改變，阻止抑制性神經(jīng)介質γ-氨基丁酸的釋放，使肌肉活動的興奮與抑制失調，造成麻痹性痙攣,典型的癥狀苦笑面容角弓反張

5、其它,免疫性,破傷風免疫屬外毒素免疫，主要是抗毒素發(fā)揮中和作用（毒素與中樞神經(jīng)組織結合非常牢固，一旦結合即非抗毒素所能中和）病后不會獲得牢固免疫力獲得有效抗毒素的途徑是人工免疫,微生物學檢查法,一般不進行涂片鏡檢和分離培養(yǎng)典型的癥狀和病史即可作出診斷,防治原則,防止創(chuàng)口厭氧微環(huán)境的形成特異性預防：注射破傷風類毒素 三聯(lián)疫苗 免疫程序：3、4、5月 3次 2、7歲加強

6、 2次 特殊情況 1次緊急預防：注射破傷風抗毒素（tetanus antitoxin，TAT）特異性治療：早期足量使用抗毒素及抗生素,二、 產氣莢膜梭菌,(C．perfringens ),生物學性狀形態(tài)與染色,兩端平切粗大桿菌芽胞位于次極端，呈橢圓形，不大于菌體無鞭毛體內有明顯的莢膜,,培養(yǎng)特性,生長迅速，代謝活躍，45℃生長最好血瓊脂平板：雙層溶血環(huán)

7、 內環(huán)完全溶血-θ毒素 外環(huán)不完全溶血- α毒素蛋黃瓊脂平板：Nagler反應牛奶培養(yǎng)基：“洶涌發(fā)酵” （stormy fermentation）,分型,分為5個毒素型對人致病的：A型,致病性致病物質,外毒素,產氣莢膜梭菌主要和次要毒素及其分型,致病物質,α毒素以A型產生量最大引起血管通透性增加伴大量溶血、組織壞死、肝臟、心功能受損在氣性壞疽的

8、形成中起主要作用β、ε、ι毒素引起壞死損傷和血管通透性增加腸毒素,所致疾病,氣性壞疽主要由A型產氣莢膜梭菌引起致病條件與破傷風梭菌相同潛伏期短，發(fā)展迅速，病情險惡，死亡率高，以組織壞死，氣腫和全身中毒為特征 組織壞死、血管內皮損傷，通透性上升 出血、水腫、局部壞死 分解糖產氣，壓迫軟組織、血管

9、 加重組織壞死（捻發(fā)音） 分解組織，病變迅速擴散，引起全身中毒癥狀,,,,,食物中毒食入被大量細菌污染的食物（多為肉類）臨床表現(xiàn)：腹痛、腹脹、水樣腹瀉；可自愈,微生物學檢查法,直接涂片鏡檢深部創(chuàng)口取材涂片革蘭陽性大桿菌白細胞少且不典型伴有其它雜菌早期診斷能避免病人最終截肢或死亡,分離培養(yǎng)及動物實驗接種血平板或庖

10、肉培養(yǎng)基，鏡檢及生化反應鑒定動物實驗如懷疑食物中毒，在發(fā)病后一日內，檢出大于105病菌/克食品或106病菌/克糞便可確立診斷,防治原則,預防及時處理傷口，破壞和消除厭氧微環(huán)境預防性的使用抗生素治療局部感染的處理抗生素α抗毒素高壓氧艙法,三、肉毒梭菌,（C．botulinum）,生物學特性,芽胞呈橢圓形，粗于菌體，位于次極端，使細胞呈湯匙狀或網(wǎng)球拍狀根據(jù)神經(jīng)毒素的抗原性分A~G 7個型，各型毒素只能被同型抗毒素中和肉

11、毒毒素不耐熱，煮沸1分鐘即可被破壞,致病性,致病物質 肉毒毒素劇毒（對人致死量為0.1µg)功能和致病機制與破傷風外毒素相似,作用機制,作用于外周神經(jīng)肌肉接頭處，抑制外周神經(jīng)介質乙酰膽堿的釋放，導致弛緩性麻痹前體分子存在，可穩(wěn)定存在于外環(huán)境和胃腸道。復合物進入小腸后，在堿性情況下解離，被吸收進入血循環(huán),所致疾病,食物中毒進食污染食物（多為罐頭、肉制品、豆制品）發(fā)生食物中毒---食入毒素臨床表現(xiàn)：少見胃腸道癥狀，主

12、要為神經(jīng)末梢麻痹（松馳型）乏力、頭痛→眼肌麻痹：復視、斜視、眼瞼下垂→咽部肌肉麻痹：吞咽、咀嚼困難、口齒不清→膈肌麻痹，呼吸困難→窒息死亡神志清楚病死率高,所致疾病,嬰兒肉毒病細菌進入腸道，繁殖，產生毒素而致病以6個月以內的小嬰兒居多癥狀與肉毒食物中毒類似，便閉、吸乳、啼哭無力病死率不高,微生物學檢查法,標本食物中毒患者：食物嬰兒肉毒病患者：糞便糞便、食物等標本可先80°C加熱10分鐘，再厭氧培養(yǎng)毒素檢查

13、,防治原則,加強食品衛(wèi)生管理和監(jiān)督，提高防范意識 （低溫保存食物，高溫破壞毒素）盡早根據(jù)癥狀作出診斷，迅速注射A、B、E三型多價抗毒素，同時加強護理和對癥治療,四、 艱難梭菌,（ C．difficile）,概述,新生兒腸道中正常菌群因長期使用抗生素引起,致病性,產生A、B兩種毒素，即腸毒素和細胞毒素因長期使用抗生素導致菌群失調后可引起內源性感染或院內交叉感染臨床表現(xiàn)：假膜性腸炎,第二節(jié) 無芽胞厭氧菌,概述,屬人體內的正常菌群，

14、包括革蘭陽性和革蘭陰性的球菌和桿菌在某些特定狀態(tài)下，這些厭氧菌作為條件致病菌可導致內源性感染,一、主要種類、性狀和在感染中的作用,與人類疾病相關的主要無芽胞厭氧菌,常見的致病菌,G-桿菌：脆弱類桿菌(B．fragilis)臨床上最常見的無芽胞厭氧菌分離株G-球菌：韋榮菌屬咽喉部主要厭氧菌,常見的致病菌,G+球菌：消化鏈球菌屬僅次于脆弱類桿菌主要寄居于陰道G+桿菌：丙酸桿菌屬：痤瘡丙酸桿菌雙歧桿菌屬真桿菌屬,二、 致

15、病性,致病條件,屬正常菌群，在成為條件致病菌后，可引起內源性感染感染條件寄居部位改變宿主免疫力下降菌群失調厭氧微環(huán)境,感染特征,內源性感染，可及全身，多呈慢性無特定病型，大多為化膿性感染分泌物或膿液粘稠，乳白色、粉紅色、血色或棕黑色，有惡臭，有時有氣體使用氨基糖苷類抗生素長期無效分泌物直接涂片可見細菌，但普通培養(yǎng)法無細菌生長,臨床上遇到以下情況，應考慮有無厭氧菌感染,所致疾病,敗血癥中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染呼吸道感染口腔