響應面法優(yōu)化閃式提取羅漢松總黃酮及其抗氧化活性

1、響應面法優(yōu)化閃式提取羅漢松總黃酮及響應面法優(yōu)化閃式提取羅漢松總黃酮及其抗氧化活性抗氧化活性王全澤1，袁堂豐1，劉磊磊12，王歡1，郭婕12(1.吉首大學林產化工工程湖南省重點實驗室，湖南張家界427000；2.湖南省植物功能成分利用協(xié)同創(chuàng)新中心，湖南長沙410428)摘要：該文對羅漢松總黃酮提取工藝及其抗氧化活性進行了研究，采用閃式提取法提取羅漢松總黃酮，并通過單因素法和響應面優(yōu)化方法，同時考察了羅漢松總黃酮對DPPH?、O2?和?OH

2、自由基清除作用。結果表明，閃式提取羅漢松總黃酮最佳工藝條件為：乙醇體積分數(shù)71%、料液比1:36(gmL)、提取時間53s、提取電壓為75V時，羅漢松總黃酮提取率為8.147%。羅漢松總黃酮對DPPH?、O2?和?OH自由基具有明顯的清除能力，最大清除率分別達到87.13%、58.24%和67.56%，為羅漢松的綜合開發(fā)利用提供了參考。關鍵字關鍵字：羅漢松；總黃酮；閃式提取；抗氧化活性；中圖分類號：中圖分類號：R284.2文獻標志碼：文

3、獻標志碼：AOptimizationofFlashExtractionofFlavonoidsfromLeavesofPodocarpusMacrophyllusbyResponseSurfaceMethodAntioxidantActivityWangQuanze1，YuanTangfeng1，LiuLeilei12WangHuan1，GuoJie12(1KeyLabatyofHunanFestProductChemicalIndus

4、tryEngineeringJishouUniversityZhangjiajie427000ChinaHunan2.HunanCoInnovationCenterfUtilizationofBotanicalFunctionalIngredientsChangsha410428HunanChina)Abstract1：TheflashextractionoftotalflavonoidsfromtheleavesofPodocarpu

5、smacrophyllushasbeenoptimizedbyresponsesurfacemethodantioxidantactivitieswerestudied.ThedesignofextractionoftotalflavonoidsisfromBoxBehnkencentralcompositeexperiment，atthesametimethescavengingactivitiesonDPPH?、O2??OHfree

6、radicalofthetotalflavonoidsofPodocarpusmacrophyllusweremeasured.TheresultsshowthattheextractionrateoftotalflavonoidsofPodocarpusmacrophylluswas8.147%，theoptimumconditionswereobtainedasfollows:theethanolconcentrationwas71

7、%，thematerialliquidratio1:36(gmL)，theextractiontimeis53sthevoltageis75V.Totalflavonoidsof1收稿日期：接受日期：基金項目：國家自然科學基金地區(qū)項目（31560105）；湖南省自然科學基金項目(14JJ6036)；張家界市科技發(fā)展專項（2014YB16）；吉首大學2012年人才引進專項(jsdxrcyjkyxm2012)作者簡介：王全澤(1992)，男

8、，碩士研究生，電話：13257447707，Email：465183659@。通訊作者：郭婕(1982)，女，博士，副教授，電話:15074448905，Email:xyxdyd@。1.2.1羅漢松總黃酮的測定1.2.1.1溶液制備精密稱取蘆丁標準品25.62mg，置于50mL容量瓶中，用體積分數(shù)為70%乙醇溶液溶解、定容至刻度線，搖勻，配制成0.5124gL蘆丁對照品儲備液，備用。精密稱取干燥的羅漢松葉樣品1.0g，用一定體積分數(shù)的乙

9、醇溶液按一定的料液比和提取電壓在閃式提取器中提取一定時間，經離心、過濾后，將所得溶液用體積分數(shù)70%的乙醇定容至50mL容量瓶中，搖勻，得到樣品溶液。1.2.1.2標準曲線繪制采用NaNO2Al(NO3)3比色法[18]，分別量取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mL蘆丁標準品溶液置于10mL容量瓶中，各加入質量分數(shù)5%的亞硝酸鈉溶液0.2mL，搖勻，靜置5min，再分別加入質量分數(shù)10%的硝酸鋁溶液0.2mL，搖勻

10、。靜置5min，最后分別加入1.0mmolL氫氧化鈉溶液2.0mL，搖勻，靜置15min，用蒸餾水定容至刻度線，搖勻于506nm波長下測定其吸光度值，繪制以蘆丁對照品溶液質量濃度(X，mgmL)為橫坐標，吸光度(Y)為縱坐標的標準曲線。1.2.1.3羅漢松總黃酮得率的計算精確量取0.2mL樣品溶液于10mL容量瓶中，按“1.2.1.2”節(jié)方法測定吸光度，帶入回歸方程，求出樣品溶液中總黃酮濃度，并按下式計算總黃酮得率。%1001??mVP

11、y其中：P1—羅漢松葉粉末提取液中總黃酮質量濃度，gmL；V—提取液體積，mL；m—羅漢松葉粉末質量，g。1.2.2單因素實驗設計在一定的條件下，分別考察乙醇體積分數(shù)(A)、料液比(B)、提取時間(C)、提取電壓(D)對羅漢松總黃酮得率的影響。1.2.3響應面分析實驗設計在單因素實驗基礎上，選定合適的工藝參數(shù)采用BoxBehnken設計方案，以乙醇體積分數(shù)(A)、料液比(B)、提取時間(C)、提取電壓(D)為自變量，以總黃酮的得率Y設計