生物化學第四版課后答案

1、生物化學第四版課后答案生物化學第四版課后答案2蛋白質化學1用于測定蛋白質多肽鏈N端、C端的常用方法有哪些？基本原理是什么？解答：（1）N末端測定法：常采用―二硝基氟苯法、Edman降解法、丹磺酰氯法。①―二硝基氟苯(DNFB或FDNB)法：多肽或蛋白質的游離末端氨基與―二硝基氟苯（―DNFB）反應（Sanger反應），生成DNP―多肽或DNP―蛋白質。由于DNFB與氨基形成的鍵對酸水解遠比肽鍵穩(wěn)定，因此DNP―多肽經酸水解后，只有N―末

2、端氨基酸為黃色DNP―氨基酸衍生物，其余的都是游離氨基酸。②丹磺酰氯(DNS)法：多肽或蛋白質的游離末端氨基與與丹磺酰氯（DNS―Cl）反應生成DNS―多肽或DNS―蛋白質。由于DNS與氨基形成的鍵對酸水解遠比肽鍵穩(wěn)定，因此DNS―多肽經酸水解后，只有N―末端氨基酸為強烈的熒光物質DNS―氨基酸，其余的都是游離氨基酸。③苯異硫氰酸脂（PITC或Edman降解）法：多肽或蛋白質的游離末端氨基與異硫氰酸苯酯（PITC）反應（Edman反應）

3、，生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白質。在酸性有機溶劑中加熱時，N―末端的PTC―氨基酸發(fā)生環(huán)化，生成苯乙內酰硫脲的衍生物并從肽鏈上掉下來，除去N―末端氨基酸后剩下的肽鏈仍然是完整的。④氨肽酶法：氨肽酶是一類肽鏈外切酶或叫外肽酶，能從多肽鏈的N端逐個地向里切。根據不同的反應時間測出酶水解釋放的氨基酸種類和數量，按反應時間和殘基釋放量作動力學曲線，就能知道該蛋白質的N端殘基序列。3指出下面pH條件下，各蛋白質在電場中向哪個方向移動，即正極，負極，

4、還是保持原點？（1）胃蛋白酶（pI1.0），在pH5.0；（2）血清清蛋白（pI4.9），在pH6.0；（3）α脂蛋白（pI5.8），在pH5.0和pH9.0；解答：（1）胃蛋白酶pI1.0＜環(huán)境pH5.0，帶負電荷，向正極移動；（2）血清清蛋白pI4.9＜環(huán)境pH6.0，帶負電荷，向正極移動；（3）α脂蛋白pI5.8＞環(huán)境pH5.0，帶正電荷，向負極移動；α脂蛋白pI5.8＜環(huán)境pH9.0，帶負電荷，向正極移動。4何謂蛋白質的變性與沉