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1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)考試試題考試試題11.說(shuō)說(shuō)離子交換層析中洗脫液的選擇原則說(shuō)說(shuō)離子交換層析中洗脫液的選擇原則①陰離子交換劑選用陽(yáng)離子緩沖液(如氨基乙酸、銨鹽、Tris等),陽(yáng)離子交換劑選用陰離子緩沖液(如乙酸鹽、磷酸鹽等),以防緩沖離子參與交換過(guò)程,降低交換劑的交換容量。②緩沖液pH值的選擇要使被分離物質(zhì)的電荷與平衡離子電荷的正負(fù)性相同。③選用的緩沖系統(tǒng)對(duì)分離過(guò)程無(wú)干擾。④要確定一定的離子強(qiáng)度。12、離子交換層析的原理:、離子交換
2、層析的原理:離子交換層析法是以具有離子交換性能的物質(zhì)作固定相利用它與流動(dòng)相中的離子能進(jìn)行可逆的交換性質(zhì)來(lái)分離離子型化合物的一種方法。13、親和層析的原理:、親和層析的原理:親和層析是應(yīng)用生物高分子與配基可逆結(jié)合的原理將配基通過(guò)共價(jià)鍵牢固結(jié)合于載體上而制得的層析系統(tǒng)。這種可逆結(jié)合的作用主要是靠生物高分子對(duì)它的配基的空間結(jié)構(gòu)的識(shí)別。14、吸附層析的原理:、吸附層析的原理:組份在吸附劑表面吸附固定相是固體吸附劑各能力不同而進(jìn)行分離的方法。15
3、、試述凝膠層析原理,并列出常用凝膠名稱、試述凝膠層析原理,并列出常用凝膠名稱凝膠層析柱裝有多孔凝膠,當(dāng)含有各組分的混合液流經(jīng)凝膠層析柱時(shí),各組分在層析柱內(nèi)同時(shí)進(jìn)行兩種不同的運(yùn)動(dòng)。一種是隨著溶液流動(dòng)而進(jìn)行的垂直向下的移動(dòng),另一種是無(wú)定向的分子擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)。大分子物質(zhì)由于分子直徑大,不能進(jìn)入凝膠微孔,只能分布于凝膠顆粒的間歇中以較快速度流過(guò)凝膠柱。較小的分子能進(jìn)入凝膠微孔,不斷進(jìn)出一個(gè)個(gè)顆粒的微孔內(nèi)外,因此流動(dòng)速度較慢,從而使混合溶液中各組分按
4、照相對(duì)分子量由大到小順序先后流出層析柱得到分離。常用凝膠:葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠。16、說(shuō)明紙層析和離子交換層析分離氨基酸混合物的方法是根據(jù)氨基酸的什么性質(zhì)說(shuō)明紙層析和離子交換層析分離氨基酸混合物的方法是根據(jù)氨基酸的什么性質(zhì)紙層析是分配層析,利用分配系數(shù)不同,即氨基酸在兩相中的溶解能力不同。離子交換層析利用氨基酸是兩性物質(zhì),在一定pH下不同氨基酸帶電性質(zhì)和帶電量不同,因此交換能力不同。17、簡(jiǎn)述薄層層析法分離糖類的原理、
5、簡(jiǎn)述薄層層析法分離糖類的原理薄層層析的實(shí)質(zhì)就是吸附層析,也就是在鋪有吸附劑的薄層上,經(jīng)過(guò)反復(fù)地被吸附劑吸附以及被擴(kuò)展劑擴(kuò)展的過(guò)程。而吸附劑對(duì)不同的物質(zhì)的吸附力不同,從而使糖在薄層上的涌動(dòng)速度不同達(dá)到分離的目的紙層析分離氨基酸紙層析分離氨基酸1為什么苯丙氨酸的為什么苯丙氨酸的Rf值大于賴氨酸值大于賴氨酸因?yàn)樗c濾紙的吸附性很強(qiáng),故擴(kuò)散的慢,郵寄溶劑與濾紙吸附性差,故擴(kuò)散的快。苯丙氨酸是非極性氨基酸,其易隨著有機(jī)溶劑一起擴(kuò)散,而賴氨酸正好相
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