SSR分析玉米自交系和雜交種的研究.pdf

1、本研究應(yīng)用SSR分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)玉米(Zeamays.L.)自交系和雜交種共計(jì)41份材料，進(jìn)行了研究，建立了一套簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確可靠的分子技術(shù)鑒定體系，構(gòu)建了玉米自交系和雜交種的SSR指紋圖譜數(shù)據(jù)庫(kù)，篩選出了一批在玉米自交系和雜交種上具有較高多態(tài)性的SSR引物。通過常規(guī)純度鑒定實(shí)驗(yàn)和實(shí)踐應(yīng)用驗(yàn)證，利用該技術(shù)體系鑒定雜交玉米種子的純度是可行的。主要研究結(jié)果如下： 1.探索出了適合玉米DNA提取，PCR擴(kuò)增，PAGE電泳、銀染檢測(cè)的技

2、術(shù)體系。 2.利用30對(duì)分別位于10對(duì)染色體上的引物對(duì)玉米材料進(jìn)行了SSR分析。在35份自交系中共檢測(cè)出299個(gè)等位基因變異，變幅4-19個(gè)，平均9.97個(gè)；多態(tài)性信息量為0.869-0.108，平均為0.593。 3.根據(jù)SSR指紋圖譜，利用UPGMA法將供試系劃分為5類：分別是Ⅰ，5033、黃C、478、488、改良478、9046、滑986、952433、7922、2433、248、318、黃糯478、黑糯478、

3、C8605、65232、改良65、鄭58-3、改良鄭58、鄭58、8112；Ⅱ，9041；Ⅲ，P138、598、178、137、Ex12、W71-2；Ⅳ，9010、340、鄭22；Ⅴ，昌7-2、H21、Hn淺黃糯、Hn黑糯。劃分結(jié)果與根據(jù)地理來源、種質(zhì)系譜的分類結(jié)果基本一致。 4.從30對(duì)SSR引物中，按照其PIC值和染色體上的分布，選取10對(duì)核心引物，其帶型穩(wěn)定、清晰，構(gòu)建了數(shù)字化的指紋，能夠較好地區(qū)分35份自交系材料。

4、 5.利用分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行玉米雜交組合純度鑒定是可行的。本研究對(duì)6個(gè)玉米雜交組合進(jìn)行了SSR分析，從30對(duì)SSR引物中篩選到6對(duì)適合玉米雜交種的多態(tài)性好的引物，編號(hào)為Umc1002、Bnlg1112、Bnlg238、Umc1153、Phi072、Bnlg240，可分析6個(gè)供試玉米雜交種的純度。 6.建立了較系統(tǒng)的純度鑒定體系：種子催芽2-3d，CTAB法提取DNA，篩選的引物進(jìn)行SSR分析，銀染法檢測(cè)指紋圖譜，與標(biāo)準(zhǔn)圖譜比較鑒