FEN1基因的遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)調(diào)控及其與多種腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文FEN1基因的遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)調(diào)控及其與多種腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系姓名：楊明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：腫瘤學(xué)（基礎(chǔ)）指導(dǎo)教師：林東昕20080401北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文／楊明摘要摘要背景和目的：FENI(Flapendonuclease1)通過參與多種DNA代謝途徑在維護(hù)基因組穩(wěn)定性和防止細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過程中發(fā)揮重要作用FENI基因的遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)改變可能影響其表達(dá)水平，從而與宿主的腫瘤易感性和腫瘤進(jìn)展相

2、關(guān)。本研究篩查了漢族人群FENl基因功能性遺傳變異及其啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)的改變并探討其與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。方法：以全基因策略分析FENI遺傳變異；用一系列生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)研究遺傳變異對(duì)基因功能的影響。以彗星實(shí)驗(yàn)(Comettest)測(cè)定攜帶不同基因型焦?fàn)t作業(yè)工人白細(xì)胞DNA損傷修復(fù)程度。以重亞硫酸鹽DNA測(cè)序法分析FENl啟動(dòng)子甲基化改變，實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)FENImRNA表達(dá)量。以cDNA芯片和組織芯片技術(shù)檢測(cè)陋Ⅳ，在多種腫瘤標(biāo)本中的表達(dá)

3、情況。以病例對(duì)照研究方法分析遺傳變異與腫瘤易感性的關(guān)系，相關(guān)程度以多因素logistic回歸計(jì)算的比值Et(oddsratio，OR)及其95％可信區(qū)限(confidenceinterval，c0表示。所有統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)均為雙側(cè)檢驗(yàn)。結(jié)果：DNA測(cè)序發(fā)現(xiàn)FENl基因存在兩個(gè)高度連鎖的單核苷酸多態(tài)，liP69G／A和4150G／T多態(tài)。位于啟動(dòng)子區(qū)的一69AG改變可能增加抑制性轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合從而降低FENl轉(zhuǎn)錄活性，而4150GT改變?cè)黾覨ENI

4、表達(dá)。在焦?fàn)t作業(yè)工人中，攜帶FENl69G或4150G等位基因者DNA損傷程度顯著高于攜帶69A或4150T者。含1，013例肺癌和l，131例對(duì)照的病例對(duì)照分析顯示，69GG或4150GG基因型單獨(dú)或與吸煙有相乘的聯(lián)合作用增加肺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。與相應(yīng)的正常組織相比，多種腫瘤中FENImRNA的表達(dá)顯著上調(diào)。在伴有不典型增生的良性乳腺疾病和各種乳腺痛組織中皆有FENI表達(dá)，且其表達(dá)量隨腫瘤的進(jìn)展而逐漸升高。FENI啟動(dòng)子含兩個(gè)CpG島。其中