P120ctn及相關(guān)蛋白在宮頸癌組織和細(xì)胞系中的表達(dá)及生物學(xué)意義.pdf

1、目的：檢測(cè)P120ctn及相關(guān)的E-cad、β-cat和Ki67蛋白在宮頸癌組織中的表達(dá)與分布，分析P120ctn及相關(guān)蛋白的表達(dá)與宮頸癌分化程度、增殖程度、FIGO臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。在此基礎(chǔ)上，檢測(cè)宮頸癌細(xì)胞系中P120ctn及相關(guān)蛋白的表達(dá)，分析細(xì)胞系與組織的表達(dá)是否一致，探討P120ctn異常表達(dá)是否涉及到P120ctn的磷酸化修飾，并進(jìn)一步檢測(cè)宮頸癌細(xì)胞系中P120ctn及E-cad mRNA的表達(dá)，證實(shí)P120ctn

2、及相關(guān)蛋白異常表達(dá)在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用，為宮頸癌的診斷及治療提供新的靶點(diǎn)，為進(jìn)一步研究腫瘤發(fā)展轉(zhuǎn)移的內(nèi)在機(jī)制奠定理論基礎(chǔ)。 方法: 1)免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)宮頸鱗癌組織中P120ctn、β-cat、E-cad及Ki67蛋白的表達(dá)、分布。2)免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)宮頸腺癌(Hela)、鱗癌(Caski)細(xì)胞系中P120ctn、β-cat、E-cad及Ki67蛋白的表達(dá)、分布。3)蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)(western-blot)檢測(cè)Hel

3、a、Caski細(xì)胞系中P120ctn與磷酸化P120ctn的表達(dá)。4)RT-PCR及實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)Hela、Caski細(xì)胞系中P120ctn、E-cad mRNA的表達(dá)。 結(jié)果: 1)正常宮頸組織中P120ctn、β-cat、E-cad表達(dá)在胞膜，胞漿少見。宮頸鱗癌組織中P120ctn及E-cad胞膜表達(dá)降低，出現(xiàn)胞漿表達(dá)，異常表達(dá)率分別為 78.8％(41/52)，73.1％(38/52)；β-cat除了胞漿表達(dá)以外，

4、還伴隨胞核表達(dá)，異常表達(dá)率為75.0％(39/52)；與正常宮頸組織相比差異都有顯著性。 2)P120ctn、β-cat、E-cad的異常表達(dá)與癌細(xì)胞分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，與年齡、臨床分期無關(guān)(P>0.05)。3)正常宮頸組織中Ki67蛋白不表達(dá)或表達(dá)較少，陽性表達(dá)率為15.4％ (4/26)，宮頸鱗癌組織中Ki67蛋白出現(xiàn)陽性表達(dá)，陽性表達(dá)率為 76.9％(40/52)，差異有顯著性；Ki67蛋白陽性表達(dá)與臨床分期

5、有關(guān)(P<0.05)，與年齡、癌細(xì)胞分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P>0.05)；P120ctn異常表達(dá)與Ki67蛋白陽性表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05)。 4)正常臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系(HECV)中，P120ctn及β-cat大部分表達(dá)在胞膜，E-cad胞膜和胞漿表達(dá)量都少，Ki67陰性表達(dá)；Hela、Caski細(xì)胞系中，P120ctn及β-cat胞膜表達(dá)減少，胞漿表達(dá)增加，E-cad胞膜表達(dá)丟失，有少量胞漿表達(dá)，Ki67蛋白陽性表達(dá)。5)HEC

6、V、Hela與Caski細(xì)胞系中都有P120ctn與磷酸化P120ctn的表達(dá)； P120ctn在HECV細(xì)胞中的表達(dá)量高于Hela及Caski細(xì)胞(P<0.05)，Hela與Caski細(xì)胞之間沒有表達(dá)量差異(P>0.05)；磷酸化P120ctn在HECV細(xì)胞中表達(dá)量低于Hela及Caski細(xì)胞(P<0.05)，Hela細(xì)胞低于Caski細(xì)胞(P<0.05)。6)HECV、Hela與Caski細(xì)胞系中都有P120ctn與E-cad mR

7、NA的表達(dá)，P120ctn在Hela、Caski中的表達(dá)量分別為HECV的74.32％、78.34％，E-cad在Hela、Caski中的表達(dá)量分別為HECV的25.85％、29.84％。 結(jié)論： 1) P120ctn及相關(guān)蛋白E-cad、β-cat的異常表達(dá)參與了宮頸癌的惡性轉(zhuǎn)化過程，與腫瘤的分化、浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)，三者異常變化可作為宮頸癌變的參考依據(jù)。 2)P120ctn的異常表達(dá)與Ki67蛋白陽性表達(dá)呈正相關(guān)，提示P120c

8、tn的異常表達(dá)不僅與癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)，還可能啟動(dòng)了與細(xì)胞增殖有關(guān)的異常信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，細(xì)胞增殖程度越快，癌細(xì)胞浸潤深度越深，播散范圍越廣。3)宮頸癌細(xì)胞系中P120ctn的異常表達(dá)涉及到P120ctn的磷酸化修飾，磷酸化促使P120ctn與鈣粘蛋白-連環(huán)蛋白復(fù)合體(cadherin catenin complex， CCC)分離，發(fā)生異常表達(dá)。4)轉(zhuǎn)錄水平上，宮頸癌細(xì)胞中P120ctn及E-cad的轉(zhuǎn)錄水平低于正常內(nèi)皮細(xì)胞，提示P12