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文檔簡介
1、目的
1.了解陰道壁成纖維細胞應力后彈性蛋白(Elastin)mRNA表達水平的變化;
2.了解陰道壁成纖維細胞應力前后加入雌激素增值率的變化;
3.了解陰道壁成纖維細胞在應力后加入雌激素的作用下彈性蛋白mRNA表達水平的變化;
4探討力在盆底功能障礙性疾病(pelvic floor dysfunction,PFD)發(fā)病中的作用。
方法:
選取2009年
2、1O月至2010年9月河北醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院婦產(chǎn)科收治的因PFD需手術治療的患者12例,所有患者術前均參照美國盆腔器官脫垂定量分期法(pelvic organ prolaps quantitation,POP-Q)評分至少一個部位脫垂為Ⅲ、Ⅳ期。其中子宮脫垂合并陰道前壁脫垂5例,子宮脫垂合并陰道后壁脫垂3例,子宮脫垂合并陰道前后壁脫垂4例,另外患者中單純POP9例,POP合并SUI3例?;颊咂骄挲g為58.3±9.6歲,產(chǎn)次為2.9±
3、1.2,體重指數(shù)為23.78±1.90。所有患者均排除呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和皮膚病等結締組織疾病,所有患者術前3個月均未服用過雌激素類藥物。于手術中取陰道壁組織,對其進行原代培養(yǎng),選取第3-5代細胞作為實驗對象,用Flexcercell4000柔性基底拉伸加載系統(tǒng)對細胞施加應力,用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)測定應力前后Elastin mRNA的表達量,并取應力后細胞加入不同濃度17β-雌二醇,再測定Elastin mRNA表
4、達量,并與應力前做比較;對應力前后細胞分別加入不同濃度17β-雌二醇,用MTT方法測定細胞增殖性,并進行比較;
結果:
1.在體外培養(yǎng)條件下,應力后成纖維細胞Elastin mRNA表達量為0.4960±0.1928;應力前表達量為O.1862±0.0848,應力后表達量增加。兩組比較統(tǒng)計學差異(P<0.05),說明應力對Elastin mRNA的表達有促進作用:
2.在體外培養(yǎng)下,應力前細胞加
5、入終濃度為1×10-4mol/L、l×10-66mol/L、1×10-8mol/L、1×10-10mol/L的17β-雌二醇后增殖率分別為0.54、0.38、0.38、0.23;對應力后細胞也分別加入與應力前相同濃度的雌二醇,增值率分別為O.17、O.10、0.07、0.06,均比前組下降。比較兩組數(shù)據(jù),說明雌二醇對陰道壁成纖維細胞有促進增殖作用,不同濃度的雌二醇對陰道壁成纖維細胞的增殖作用不同,P=0.02<0.05,有統(tǒng)計學意義,且
6、隨著藥物濃度的加大增殖率也增大,其中1×10-4mol/L組對細胞的增殖率最大;施加應力與不施加應力對陰道壁成纖維細胞的增殖作用顯著不同,P<0.01,有統(tǒng)計學意義;
3.在體外培養(yǎng)條件下,應力后加入雌二醇,Elastin mRNA的表達量為0.6437±O.1100,比應力后不加雌二醇組高,兩組比較統(tǒng)計學差異(P<0.05),說明雌二醇對成纖維細胞應力后Elastin mRNA的表達有促進作用。
結論:
7、r> 1.陰道壁成纖維細胞應力后細胞生長方向與受力方向一致,并變得較狹長;
2.加力后陰道壁成纖維細胞Elastin mRNA的表達量比應力前增多,說明應力對E1astin mRNA的表達有促進作用,陰道壁成纖維細胞對應力做出反應,通過增加彈性蛋白的合成和分泌來對抗力的作用,阻止脫垂的發(fā)生;
3.應力后加入雌二醇,Elastin mRNA的表達量比應力后不加雌二醇高,說明雌激素對陰道壁成纖維細胞對抗力的
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