2型糖尿病腎病患者血小板CD62p、PAC-1的表達.pdf

1、目的：
　　 觀察2型糖尿病及糖尿病腎病患者血小板活化標記物CD62p、PAC-1的表達，及其與尿微量白蛋白排泄率的關(guān)系，探討血小板膜糖蛋白PAC-1及顆粒膜蛋白CD62p活化百分比在糖尿病腎病發(fā)病機制中的作用，為糖尿病腎病診斷、研究病情進展及抗血小板治療、療效觀察提供指導。
　　 方法：
　　 將50例健康體檢者作為對照組（NC），54例2型糖尿病無腎臟并發(fā)癥患者作為糖尿病組（DM），50例2型糖尿病腎病患者為

2、糖尿病腎病組（DN），三組年齡、體重指數(shù)相匹配。再根據(jù)尿微量白蛋白排泄率將糖尿病腎病組分為糖尿病腎病微量白蛋白尿組（DN1）和糖尿病腎病大量白蛋白尿組（DN2）兩個亞組。入選病例均化驗空腹（FPG）及早餐后2小時血糖（2hPG）、糖化血紅蛋白（HbA1C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、尿微量白蛋白排泄率（UAER），并記錄收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）。所有

3、病例空腹早8：00用3.8％枸櫞酸鈉抗凝的真空采血管采集靜脈血2ml，樣本采集不扎止血帶，棄去前2ml混有組織液的血液，直立樣本管，避免混搖振蕩，立即送實驗室檢測血小板CD62p、PAC-1。
　　 試驗管中加入全血樣本5μl，再加入CD61 PerCP、CD62pPE、PAC-1 FITC各10μl。對照管中加入全血樣本5μl，再加入CD61 PerCP、RGDS、Mouse gl PE各10μl，分別輕搖混勻，室溫避光孵育1

4、0-15分鐘后，均加入PBE磷酸鹽緩沖液0.5ml稀釋，即刻用流式細胞儀（FCM）上機檢測。上機時先根據(jù)前向角和側(cè)向角散射光信號設(shè)定血小板門，排除各種血小板聚集體，通過CD61PerCP標記確認血小板，每個樣本測10000個血小板。
　　 所有數(shù)據(jù)采用SPSS10.0軟件進行單因素方差分析，LSD、Duncan多重比較及Spearman等級相關(guān)分析，結(jié)果用均數(shù)±標準差（mean±SD）表示。
　　 結(jié)果：
　　

5、1、2型糖尿病無腎臟并發(fā)癥組與糖尿病腎病組臨床資料比較無統(tǒng)計學差異。
　　 2、DM組、DN1組、DN2組UAER分別為17.06±3.98μg/min、96.54±10.37μg/min、537.31±55.00μg/min明顯高于NC組（10.03±3.02μg/min），有統(tǒng)計學意義（P<0.01），DN1組、DN2組UAER明顯高于DM組（P<0.01），DN2組UAER明顯高于DN1組（P<0.01）。
　　

6、3、2型糖尿病腎病組血小板CD62p、PAC-1及兩者同時表達的陽性率分別為16.31±1.27％、7.97±1.15％、28.40±3.23％，與2型糖尿病組（9.73±1.75％、2.83±0.62％、10.91±1.83％）比較顯著升高（P<0.01），兩組與正常健康對照組（3.22±0.65％、0.48±0.06％、4.96±1.03％）比較顯著升高（P<0.01）。
　　 4、DN1組血小板CD62p、PAC-1及兩者

7、同時表達的陽性率分別為14.55±1.41％、8.46±1.48％、29.15±4.17％，與DN2組（分別為18.43±2.33％、7.10±1.91％、27.07±5.29％）比較無差異。
　　 5、相關(guān)分析顯示UAER與CD62p正相關(guān)（r=0.28，P<0.05），與CD62p+PAC-1呈顯著正相關(guān)（r=0.377，P<0.01），與PAC-1無關(guān)（r=0.051）。
　　 6、血小板活化與臨床資料的相關(guān)性分析

8、顯示，CD62p與DBP正相關(guān)（r=0.234，p<0.05），與LDL-C顯著正相關(guān)（r=0.269，p<0.01）；PAC-1與糖尿病病程正相關(guān)（r=0.296，p<0.05），與DBP正相關(guān)（r=0.247，p<0.05），與TC正相關(guān)（r=0.246，p<0.05）；CD62p與PAC-1均表達與DBP顯著正相關(guān)（r=0.340，p<0.01）；與LDL-C顯著正相關(guān)（r=0.335，p<0.01）。
　　 結(jié)論：

9、>　　 1、2型糖尿病患者血小板活化標志物CD62p、PAC-1表達明顯高于正常對照。
　　 2、糖尿病腎病患者血小板膜糖蛋白PAC-1及CD62p表達陽性百分率均高于糖尿病無腎臟并發(fā)癥患者。
　　 3、糖尿病腎病大量尿白蛋白患者與微量白蛋白尿患者CD62p、PAC-1表達陽性率無差異。
　　 4、糖尿病腎病尿微量白蛋白排泄率與CD62p、CD62p與PAC-1同時表達陽性率呈正相關(guān)，與PAC-1無關(guān)，檢測CD

10、62p或CD62p、PAC-1同時表達的血小板可作為糖尿病腎病臨床診斷的輔助指標，并監(jiān)測病情進展。
　　 5、檢測CD62p、PAC-1同時表達陽性率對糖尿病腎病發(fā)生、進展監(jiān)測優(yōu)于單獨檢測CD62p。
　　 6、低密度脂蛋白膽固醇、舒張壓的異常與血小板活化相關(guān)。
　　 總之，血小板膜糖蛋白PAC-1和顆粒膜蛋白CD62p活化表達的陽性百分比，反映了2型糖尿病、糖尿病腎病患者血小板活化狀態(tài)，與尿微量白蛋白排泄率呈正