丙酮醛與乙二醛酶Ⅰ對乳腺癌細胞相關(guān)生物學功能的影響及其機制.pdf

1、目 錄中英文縮略詞對照表???????????????????l中文摘要????????????????????????2英文摘要????????????????????????4前 言????????????????????????6材料與方法???????????????????????8實驗結(jié)果????????????????????????2 4分析與討論???????????????????????3 5結(jié)子各????????

2、????????????????3 7參考文獻????????????????????????3 8附 錄????????????????????????4 3致 謝????????????????????????4 4綜述及參考文獻?????????????????????4 5獨創(chuàng)性聲明???????????????????????5 5溫州醫(yī)科大學碩士學位論文丙酮醛與乙二醛酶I 對乳腺癌細胞相關(guān)生物學功能的影響及其機制中文摘要目的

3、丙酮醛( M e t h y l g l y o x a l ，M G ) 是由糖酵解產(chǎn)生的二羰基復合物，初步研究表明M G 起著重要的抗腫瘤作用。乙二醛酶系統(tǒng)是M G 降解的主要酶，由乙二醛酶I ( G l y o x a l a s eI ，G L O D 和( G i y o x a l a s e1 I ，G L O I I ) 組成。在一些腫瘤中G L O I 的表達是上調(diào)的。本研究主要研究了M G 與G L O I 干擾在乳

4、腺癌細胞株中的生物學影響以及其潛在的機制。方法1 ．構(gòu)建低表達G L O I 的穩(wěn)定細胞株運用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方式將質(zhì)粒s h G L O I 以及s h N C 轉(zhuǎn)染乳腺癌M C F ．7 細胞、M D A - M B ．2 3 1 細胞、T 4 7 D 細胞。R e a l ．t i m e P C R 、W e s t e r n b l o t 技術(shù)檢測乳腺癌細胞中G L O I m R N A 、G L O I 蛋白的表達變化，以

5、及酶活性分析檢測G L O I 酶活性的變化。2 ．在穩(wěn)定低表達細胞模型的基礎上進行功能實驗在M D A —M B - 2 3 1 細胞、M C F ．7 細胞以及T 4 7 D 細胞中和低表達G L O I 的M D A - M B ．2 3 I 細胞、M C F ．7 細胞以及T 4 7 D 細胞中加入M G 后，運用c c k - 8 檢測其細胞活性變化，t r a n s w e l l 小室實驗檢測細胞遷移和侵襲能力的變化，劃

6、痕實驗檢測細胞的遷移能力，平板克隆實驗檢測細胞的克隆形成能力，管狀形成實驗檢測其形成管狀物的能力。3 ．在穩(wěn)定低表達細胞模型的基礎上進行機制研究在M D A ．M B ．2 3 1 細胞與M C F ．7 細胞中和低表達G L O I 的M D A - M B ．2 3 l 細胞與M C F - 7 細胞中加入M G 后檢測其M A P K 家族成員p 3 8 、J N K 與E R K 家族的蛋白表達情況。同時檢測單獨和聯(lián)合作用后抗凋