生物活性多肽衍生庫(kù)的組建及其構(gòu)效關(guān)系研究.pdf

1、多肽涉及生物體內(nèi)各種細(xì)胞功能，人們已發(fā)現(xiàn)存在于生物體的多肽有數(shù)萬(wàn)種，并幾乎參與所有細(xì)胞功能，如激素、神經(jīng)、細(xì)胞生長(zhǎng)和生殖等各個(gè)領(lǐng)域。研究生物活性多肽對(duì)相應(yīng)體內(nèi)過(guò)程的影響，對(duì)新藥研發(fā)有重要意義。本工作主要針對(duì)具有重要應(yīng)用背景的生物活性肽-SARS抗原肽及基質(zhì)細(xì)胞衍生因子衍生多肽為研究對(duì)象，運(yùn)用組合化學(xué)技術(shù)分別建立相應(yīng)衍生肽庫(kù)，對(duì)相應(yīng)活性肽的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系進(jìn)行系統(tǒng)研究。論文的主要內(nèi)容如下： 1.抗原多肽P50的衍生庫(kù)構(gòu)建及構(gòu)效關(guān)系研

2、究針對(duì)SARS抗原多肽P50，以長(zhǎng)度掃描方式建立了不同長(zhǎng)度的多肽庫(kù)，并進(jìn)一步對(duì)篩選得到的有效短肽片段采用AlaScanning、LysScanning及AspScanning策略分別對(duì)目標(biāo)多肽的氨基酸殘基掃描，建立相應(yīng)的氨基酸迭代庫(kù)，并運(yùn)用經(jīng)SARSSDNA疫苗免疫的BALB/c小鼠模型，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)測(cè)定系統(tǒng)研究了該抗原多肽構(gòu)效關(guān)系。發(fā)現(xiàn)其上特定氨基酸殘基被替換后，刺激特異性T細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子干擾素-γ(INF-γ

3、)的能力減弱甚至消除。提示相關(guān)氨基酸殘基是該抗原多肽與BALB/c小鼠I類主要組織相容性復(fù)合物(MHC-I)結(jié)合并與T細(xì)胞受體(TCR)相互識(shí)別的關(guān)鍵位點(diǎn)。 2.基質(zhì)細(xì)胞衍生因子SDF-1α碳端區(qū)域的衍生庫(kù)構(gòu)建及構(gòu)象性質(zhì)研究以SDF-1α碳端長(zhǎng)為23mer的區(qū)域?yàn)槟０?，從其N端開始依次缺失一個(gè)氨基酸殘基，構(gòu)建多肽序列庫(kù)，用圓二色譜法(CD)測(cè)定每條肽在中性磷酸鹽緩沖液及中性SDS-磷酸鹽緩沖液中的二級(jí)結(jié)構(gòu)。發(fā)現(xiàn)隨肽鏈延長(zhǎng)，其CD