甘草和甘草酸防治小鼠哮喘的作用及其免疫學(xué)機(jī)制探討.pdf

1、[目的]本實(shí)驗(yàn)的目的是建立小鼠慢性支氣管哮喘模型，研究甘草和甘草酸對(duì)慢性支氣管哮喘動(dòng)物模型的療效，通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明甘草和甘草酸對(duì)哮喘機(jī)體氣道局部與整體免疫紊亂狀態(tài)的可能影響，試圖從免疫學(xué)角度探討其防治哮喘的作用機(jī)制。 [方法]選用100只雌性小鼠，體重(27±3)g，隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組(A組)，哮喘模型組(B組)，強(qiáng)的松組(C組)，甘草組(D組)，甘草酸組(E組)。建立小鼠慢性支氣管哮喘模型，HE染色觀察小鼠肺組織形態(tài)學(xué)變化和

2、免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)肺組織中eotaxin蛋白的表達(dá)，EOS計(jì)數(shù)，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)各組小鼠血清IFN-γ，IL-4和IgE的水平，鹽酸滴定法測(cè)定肺組織和血清中PLA2活性，測(cè)定胸腺和脾指數(shù)。所有的數(shù)據(jù)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 [結(jié)果]1.卵蛋白致敏和霧化吸入可致小鼠呈現(xiàn)慢性支氣管哮喘的病理學(xué)改變 用卵蛋白致敏小鼠3周及誘發(fā)哮喘4周后，病理切片鏡下可見(jiàn)支氣管粘膜腫脹充血，支氣管內(nèi)可見(jiàn)粘液栓，氣道上

3、皮下有大量嗜酸性粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，氣道粘膜下組織水腫，纖毛上皮剝離，管腔阻塞。這些病理學(xué)改變與人類(lèi)慢性支氣管哮喘的病理改變相似。 2.小鼠氣道上皮eotaxin蛋白表達(dá)的變化慢性支氣管哮喘小鼠氣道上皮中eotaxin蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。經(jīng)強(qiáng)的松治療后哮喘小鼠氣道上皮eotaxin蛋白表達(dá)下降(P＜0.05)，但仍高于正常對(duì)照組。甘草和甘草酸治療后氣道上皮eotaxin蛋白的表達(dá)也與

4、強(qiáng)的松相似。 3.小鼠外周血的EOS計(jì)數(shù)的變化慢性支氣管哮喘小鼠外周血的EOS計(jì)數(shù)高于正常對(duì)照組(P＜0.05)，經(jīng)強(qiáng)的松治療后EOS計(jì)數(shù)低于哮喘模型組(P＜0.05)，但仍高于正常對(duì)照組。甘草和甘草酸治療后EOS計(jì)數(shù)也與強(qiáng)的松相似。 4.小鼠血清IFN-γ的水平慢性支氣管哮喘小鼠的血清IFN-γ低于正常對(duì)照組(P＜0.05)，經(jīng)強(qiáng)的松治療后血清IFN-γ高于哮喘模型組(P＜0.05)。甘草和甘草酸治療后血清IFN-γ升

5、高也與強(qiáng)的松相似。 5.小鼠血清IL-4和IgE的水平慢性支氣管哮喘小鼠的血清IL-4和IgE高于正常對(duì)照組(P＜0.05)，經(jīng)強(qiáng)的松治療后血清IL-4和IgE低于哮喘模型組(P＜0.05)。甘草和甘草酸治療后血清IL-4和IgE降低也與強(qiáng)的松相似。 6.小鼠PLA2活性的變化慢性支氣管哮喘小鼠肺組織和血清PLA2活性高于正常對(duì)照組(P＜0.05)，經(jīng)強(qiáng)的松治療后肺組織和血清PLA2活性低于哮喘模型組(P＜0.05)。甘

6、草和甘草酸治療后PLA2活性降低也與強(qiáng)的松相似。 7.小鼠免疫器官指數(shù)的變化強(qiáng)的松治療后慢性支氣管哮喘小鼠脾指數(shù)和胸腺指數(shù)比正常對(duì)照組明顯減少(P＜0.05)，甘草、甘草酸組和正常對(duì)照組間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 [結(jié)論]1.用卵蛋白致敏和霧化吸入可致小鼠呈現(xiàn)慢性支氣管哮喘的病理學(xué)改變，這種病理變化與哮喘患者相似。 2.慢性支氣管哮喘的小鼠具有氣道上皮eotaxin蛋白表達(dá)明顯增高；外周血的EOS明顯增高；

7、血清IFN-γ降低，IgE和IL-4明顯升高；PLA2活性升高等特點(diǎn)。 3.甘草和甘草酸能有效抑制慢性支氣管哮喘小鼠產(chǎn)生的氣道炎癥，減輕支氣管哮喘的病理學(xué)癥狀。甘草和甘草酸防治小鼠哮喘的作用與抑制氣道上皮eotaxin蛋白的表達(dá)；降低EOS；降低血清IL-4和IgE的濃度，升高IFN-γ的濃度；抑制PLA2活性有關(guān)。 4.甘草和甘草酸治療慢性支氣管哮喘療效和強(qiáng)的松基本相似，副作用較少，在哮喘的防治中可考慮與皮質(zhì)激素聯(lián)合應(yīng)