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文檔簡介
1、研究卡維地洛對(duì)體外柯薩奇病毒B3(CVB3)致心肌細(xì)胞凋亡的抑制作用與機(jī)制采用差速貼壁法培養(yǎng)原代Wistar乳鼠心肌細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組分為正常對(duì)照組、病毒組、卡維地洛組及美托洛爾組,正常對(duì)照組加入不含血清的DMEM培養(yǎng)液,后三組于CVB3感染心肌細(xì)胞后分別加入不含血清的DMEM培養(yǎng)液、無血清培養(yǎng)基配制的卡維地洛、美托洛爾溶液。培養(yǎng)72h后,依次應(yīng)用倒置相差顯微鏡觀察各組心肌細(xì)胞的形態(tài)、搏動(dòng)速率,電鏡觀察心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變;分別采用黃嘌呤氧化酶
2、法測(cè)定心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥酸法測(cè)定心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中丙二醛(MDA)含量、化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中肌鈣蛋白T(cTnT)水平、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組心肌細(xì)胞凋亡率及免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)心肌細(xì)胞內(nèi)Bcl-2及Bax蛋白表達(dá)水平。
1.倒置相差顯微鏡下可見病毒組心肌細(xì)胞的數(shù)量明顯減少,細(xì)胞團(tuán)縮、變圓、成堆,搏動(dòng)范圍明顯變小,搏動(dòng)節(jié)律不規(guī)則、速率明顯降低。
2.電鏡顯示病毒感染
3、的心肌細(xì)胞肌原纖維紊亂,z線模糊不清,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見較多髓樣小體,腫脹的線粒體,嵴變短、斷裂,核周池腫脹,胞質(zhì)內(nèi)大量空泡形成,核膜內(nèi)陷、核染色質(zhì)濃縮、集邊、凝集成團(tuán)塊狀。
3.病毒組心肌細(xì)胞搏動(dòng)速率(36.40±12.76)明顯低于正常對(duì)照組(135.20±13.97)(P<0.05),卡維地洛組心肌細(xì)胞搏動(dòng)速率(96.00±11.22)明顯高于病毒組(P<0.05)。
4.卡維地洛組心肌細(xì)胞凋亡率(21.1±
4、4.00)明顯低于病毒組(38.4±7.12)及美托洛爾組(32.67±1.02)(P均<0.05)。
5.與病毒組比較,卡維地洛組心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中SOD活性(57.37±11.84vs.41.12±2.45)顯著升高(P<0.05),MDA含量(2.19±1.63vs.7.13±1.68)及cTnT水平(5.19±1.81vs.10.86±0.9)均明顯降低(P均<0.05)。
6.美托洛爾組與病毒組相比較
5、,心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中SOD活性(42.77±6.31vs.41.12±2.45)、MDA含量(6.76±2.74vs.7.13±1.68)及cTnT水平(10.77+1.34vs.10.86±0.9)均無顯著差異(P均>0.05)。
7.與病毒組及美托洛爾組比較,卡維地洛組心肌細(xì)胞內(nèi)Bcl-2蛋白表達(dá)增強(qiáng),Bax蛋白表達(dá)減弱。
卡維地洛對(duì)于體外CVB3感染的心肌細(xì)胞具保護(hù)作用,其機(jī)制可能與其抗氧化活性、上調(diào)心肌
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