慢性淋巴細(xì)胞白血病的分子細(xì)胞遺傳學(xué)研究.pdf

1、目的:探討常規(guī)細(xì)胞遺傳學(xué)(conventional cytogenetics，CC)分析、組合探針熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)技術(shù)對(duì)慢性淋巴細(xì)胞白血病(chronic lymphocytic leukemia，CLL)患者染色體異常的檢測(cè)價(jià)值，研究我國(guó)CLL患者染色體異常的特點(diǎn)，并分析染色體異常對(duì)CLL患者的預(yù)后價(jià)值及同其他預(yù)后指標(biāo)，包括ZAP-70(70-kD zeta

2、-associated protein)、CD38、血清乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase，LDH)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)及淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)的相關(guān)性。 方法:對(duì)61例CLL患者的骨髓或外周血標(biāo)本，加入植物血凝素(phytohemagglutinin，PHA)刺激CLL白血病細(xì)胞的增殖及分裂，采用短期培養(yǎng)法培養(yǎng)72h制備染色體標(biāo)本；采用常規(guī)R顯帶技術(shù)進(jìn)行常規(guī)核型分析；同時(shí)

3、應(yīng)用一組探針(LSI D13S319、LSI p53和CEP17，LSI ATM，CEP 12，LSI MYB，LSI IGH Dual Color,Break ApartRearrangement Probe)進(jìn)行FISH檢測(cè)；采用多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry，F(xiàn)CM)檢測(cè)CD5+CDl9+細(xì)胞CD38、ZAP-70的表達(dá)。 結(jié)果: 61例CLL患者中60例進(jìn)行了CC檢測(cè)，結(jié)果顯示：11.7％存在異常，其中3例

4、(5.0％)未見(jiàn)分裂象；61例患者的FISH檢測(cè)結(jié)果顯示：49例(80.3％)存在一種及一種以上細(xì)胞遺傳學(xué)異常，34例(55.7％)顯示存在del(13q14)異常，13例(21.3％)有del(17p13)異常，13例(21.3％)檢出+12異常，13例(21.3％)顯示存在涉及14q32的IgH重排，del(11q22)異常者7例(11.5％)，del(6q23)異常者3例(4.9％)。在50例CC結(jié)果核型正常的CLL患者中，應(yīng)用組

5、合探針FISH技術(shù)檢測(cè)顯示41例存在異常；7例CC異常核型的患者中，3例患者FISH技術(shù)未檢測(cè)出異常；3例CC未見(jiàn)分裂象的CLL患者中，應(yīng)用FISH技術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)2例存在單一的del(13q14)，1例存在del(13q14)伴+12異常。del(17p13)、del(11q22)異常多見(jiàn)于淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)≥50×10<'9>/L組、以及LDH、β2-MG、CD38高表達(dá)水平組，而FISH檢測(cè)無(wú)染色體異常和單一del(13q14)異常多見(jiàn)于

6、淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)≤50×10<'9>/L組、以及LDH、β2-MG、CD38低表達(dá)水平組。伴有del(13q14)異常的患者存期明顯長(zhǎng)于無(wú)del(13q14)異常者[(166.83±13.85)個(gè)月vs(86.18±7.55)個(gè)月]，但兩組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.053)；伴有del(17p13)異常患者的生存期明顯短于無(wú)del(17p13)異?；颊遊(65.11±13.45)個(gè)月vs(175.30±6.53)個(gè)月]，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)

7、意義(P=0.000)；del(11q22)異常(P=0.479)、IgH重排(P=0.287)及del(6q23)(P=0.742)其差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論:由于CLL白血病細(xì)胞有絲分裂低下，雖加入刺激劑PHA，但是CC的染色體異常檢出率仍很低；組合探針FISH技術(shù)則大大提高了異常染色體的檢出率，del(13q14)異常是CLL最常見(jiàn)的染色體異常。單-del(13q14)異?；颊叨嘁?jiàn)于淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)低于50×10<'9>