氟化指示劑5F-BAPTA-AM的合成研究.pdf

1、應(yīng)用19F-NMR法檢測鈣離子需要氟代指示劑，5F-BAPTA-AM是應(yīng)用最廣的氟代指示劑，它對鈣離子有很高的選擇親和力，并且受細(xì)胞內(nèi)pH值影響很小。另外，用5F-BAPTA檢測時，細(xì)胞內(nèi)較高的熒光背景不會對檢測結(jié)果造成很大的影響?！　≡诤铣蛇@種指示劑的過程中，首先利用2，4-二氟硝基苯與氫氧化鉀J在45℃反應(yīng)合成了原料5-氟-2-硝基酚，并用乙酰溴與多聚甲醛(摩爾比l：1)反應(yīng)合成了乙酸溴甲酯；等摩爾的5-氟-2-硝基酚與氫氧化鈉在

2、無水甲醇內(nèi)反應(yīng)得到對應(yīng)的鈉鹽；該鈉鹽與過量的1，2一二溴乙烷在162℃反應(yīng)得到1，2-二(5-氟-2-硝基苯氧基)乙烷；該產(chǎn)物可通過鐵粉還原或氫化還原兩種途徑還原，氫化還原高效快捷，但對設(shè)備要求較高；還原產(chǎn)物與過量的溴乙酸甲酯(摩爾比1：6)在氦氣環(huán)境下反應(yīng)，反應(yīng)溫度91℃，產(chǎn)物用柱色譜分離后用95％乙醇重結(jié)晶；重結(jié)晶產(chǎn)物在無水甲醇內(nèi)與等量的氫氧化鉀，回流反應(yīng)完成后提純；在氮氣環(huán)境下，5F-BAPTA鉀鹽與過量乙酸溴甲酯(摩爾比1：5)

3、在無水乙腈中反應(yīng)，反應(yīng)溫度91℃，產(chǎn)物用柱色譜分離后在無水甲醇中加熱完全溶解，在-4℃冷凍室內(nèi)析出無色粒狀結(jié)晶，即5F-BAPTA-AM。利用高效液相色譜HPLC檢測了產(chǎn)物純度，并利用質(zhì)譜、紫外光譜、核磁氫譜等檢測手段鑒定原料5-氟-2-硝基酚和最終產(chǎn)物5F-BAPTA-AM結(jié)構(gòu)，并與文獻(xiàn)中資料進(jìn)行對照，確定了兩種化合物的結(jié)構(gòu)，為了確定實驗過程的正確性，還對部分過程產(chǎn)物進(jìn)行了質(zhì)譜檢測，并進(jìn)行了分析，證明了反應(yīng)過程的正確性和可行性。