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文檔簡介
1、本文以酪氨酸酶抑制率和DPPH自由基清除率的綜合評分為指標,對當歸補血湯中的美白活性物進行提取、純化和安全性評價,并進一步探討其對酪氨酸酶抑制作用的類型和美白機理,最后對其進行相應的應用研究,為天然中藥復方美白劑的開發(fā)和推廣提供了基礎(chǔ)思路和理論依據(jù)。本文研究內(nèi)容如下:
1)以綜合評分為指標,運用均勻設(shè)計法探索當歸補血湯美白功效的最佳藥效配比。結(jié)果顯示,基于美白功效,當歸補血湯的配伍最佳劑量組合為黃芪-當歸(1:7),對酪氨酸酶
2、活性的抑制率89.65%,對DPPH自由基的清除率90.96%。
2)以綜合評分為指標,運用單因素試驗考察料液比、提取溶劑和提取溫度對綜合評分的影響,再建立三因素三水平響應面分析試驗,進行多元回歸擬合分析優(yōu)選出當歸補血湯美白活性物最佳的提取工藝為:料液比1:12 g/mL,乙醇濃度為65%,提取溫度為92℃。通過驗證試驗,實際值與模型預測的理論值基本相符。
3)采用大孔樹脂吸附法對所提取得到的當歸補血湯美白活性物進行
3、純化,確定最優(yōu)純化工藝為:上樣濃度0.4 g/mL,藥液pH為3,洗脫劑70%乙醇,洗脫劑pH為9,洗脫速度2 mL/min,洗脫量200 mL。通過離體牛眼角膜濁度法和RBC溶血試驗對當歸補血美白素進行安全性評價。結(jié)果顯示,在牛眼角膜濁度試驗中,所得IVIS值均小于0,刺激性結(jié)果為溫和,不具有眼刺激性。RBC溶血試驗中,半數(shù)溶血率HC50=0.0308 g/mL,可認為當歸補血美白素無刺激性。
4)通過動力學分析,當歸補血湯
4、美白活性物對單酚酶基本沒有抑制作用;對二酚酶是可逆性抑制,其半數(shù)抑制濃度為311.24 mg/mL。利用Lineweaver-Burk雙倒數(shù)作圖法試驗分析得出抑制常數(shù)KI和KIS分別為0.0048 mg/mL和0.0062 mg/mL,可確定當歸補血湯美白活性物的抑制類型為混合型抑制。
5)在基質(zhì)配方的基礎(chǔ)上,探討乳化劑和增稠劑兩個體系以及當歸補血美白素的添加量對膚感和穩(wěn)定性的影響,從而研制當歸補血美白霜,并進行人體皮膚斑貼實
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