胃腺癌腫瘤干細(xì)胞中異常表達(dá)的miRNA初篩及miR-199b-5p的初步研究.pdf

1、胃癌是世界第二大致死惡性腫瘤，而其中胃腺癌又占95％以上。在中國(guó)，胃腺癌具有高發(fā)病率和高死亡率，病人的五年存活率非常低，因此胃腺癌是中國(guó)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題，也是中國(guó)醫(yī)學(xué)急需解決的問(wèn)題之一。本研究探究了 miR-199b-5p與干細(xì)胞標(biāo)志物Nanog及胃癌腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD44之間的關(guān)系，旨在深入了解miRNA對(duì)腫瘤以及腫瘤干細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用，并且對(duì)胃腺癌腫瘤干細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序篩選出來(lái)差異表達(dá)的miRNA，為治療胃腺癌提供新的

2、分子靶標(biāo)和研究思路。通過(guò)腫瘤細(xì)胞測(cè)序和生物信息學(xué)方法，預(yù)測(cè)出了miR-199b-5p的靶向序列位于Nanog和CD44的3’UTR區(qū)域，可能存在抑制NANOG和CD44蛋白表達(dá)的情況。實(shí)驗(yàn)部分主要通過(guò)在胃腺癌細(xì)胞系MGC803中過(guò)表達(dá)miR-199b-5p以觀察其對(duì)Nanog和CD44基因表達(dá)及蛋白翻譯水平的影響。結(jié)果說(shuō)明miR-199b-5p對(duì)Nanog沒(méi)有影響，而CD44的表達(dá)在miR-199b-5p過(guò)表達(dá)的MGC803細(xì)胞中明顯降

3、低，這一結(jié)果提示miR-199b-5p可抑制CD44基因的表達(dá)。通過(guò)在MGC803細(xì)胞中過(guò)表達(dá)miR-199b-5p，觀察miR-199b-5p對(duì)胃腺癌細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。研究發(fā)現(xiàn)，miR-199b-5p上調(diào)能顯著抑制胃腺癌細(xì)胞MGC803的增殖、迀移、侵襲及耐藥程度。這些實(shí)驗(yàn)表明，miR-199b-5p可以作為抑癌基因，抑制腫瘤的發(fā)生、迀移、侵襲和耐藥。miR-199b-5p的細(xì)胞生物學(xué)作用可能與其抑制CD44相關(guān)。我們的結(jié)論是：m

4、iR-199b-5p是一個(gè)潛在的對(duì)腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD44具有調(diào)節(jié)作用的miRNA，通過(guò)抑制CD44從而抑制一系列腫瘤細(xì)胞生物學(xué)活性。這為胃腺癌腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD44信號(hào)通路的研究拓寬了基礎(chǔ)，也為腫瘤的診斷和治療提供給了新的分子靶標(biāo)。
　　然而，值得注意的是，miR-199b-5p在我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中表明可以抑制癌癥的發(fā)生和發(fā)展，但是我們通過(guò)small RNA測(cè)序結(jié)果來(lái)看，miR-199b-5p在類(lèi)腫瘤干細(xì)胞中的表達(dá)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于腫瘤細(xì)