AIV-PB2特異性M1GS核酶的構(gòu)建及其活性研究.pdf_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè)，還剩76頁(yè)未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、本論文針對(duì)禽流感病毒（AIV）的關(guān)鍵基因--復(fù)制酶基因PB2，設(shè)計(jì)并構(gòu)建了八種M1GS核酶，分別是M1GS-T436、M1GS-T934、M1GS-T1105、M1GS-T1523、M1GS-T1771、M1GS-C341、M1GS-C1531、M1GS-C1760。
　　通過體外切割實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)其對(duì)底物RNA的切割活性，結(jié)果顯示：M1GS-T436、M1GS-T1105、M1GS-T1523、M1GS-C1531和M1GS-C17

2、60這五種核酶均具有明顯的特異切割活性，核酶M1GS-C341也具有較強(qiáng)的切割活性，但屬于非特異性切割，而核酶M1GS-T934和M1GS-T1771則無(wú)明顯的切割活性。進(jìn)一步通過體外切割產(chǎn)物電泳圖及各核酶相對(duì)活性表等一系列進(jìn)行分析，選擇活性較高的三種核酶M1GS-T1105、M1GS-T1523、M1GS-C1760作為對(duì)象，分別構(gòu)建上述三種核酶的真核表達(dá)重組質(zhì)粒（M1GS/T1105-PLXSN、M1GS/T1523-PLXSN、M

3、1GS/C1760-PLXSN）以及PB2蛋白與綠色熒光蛋白融合表達(dá)的質(zhì)粒（PB2-EGFP），分別將這些M1GS真核表達(dá)重組質(zhì)粒與PB2-EGFP共轉(zhuǎn)染MDCK細(xì)胞。Western Blot結(jié)果顯示，三種M1GS核酶均能顯著抑制蛋白PB2的表達(dá)；掃描細(xì)胞的熒光強(qiáng)度后發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染核酶M1GS-T1105、M1GS-T1523和M1GS-C1760可大大降低綠色熒光的強(qiáng)度，抑制率分別為77.53±1.98％、58.84±0.86%和80.37

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間，僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請(qǐng)與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論